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鸡γ干扰素（ChIFN-γ）是一类具有强大的免疫调节作用以及广谱抗病毒、抗细菌、抗寄生虫等作用的细胞因子，是由活化的Th细胞和NK细胞所产生一种Ⅱ型干扰素。实验室前期在烟草植物中成功表达ChIFN-γ，发现转ChIFN-γ基因烟叶具有显著的抗斜纹夜蛾幼虫和烟青虫效果，推测ChIFN-γ具有一定的抗虫功能，通过全基因组表达谱芯片，结合生物信息学分析筛选得到与转ChIFN-γ基因烟草抗虫相关的3个候选基因，即CAF1、HD和Cop8/CSN4。 将HD、CAF1和Cop8构建到原核表达载体pET28a中，并转化到BL21（DE3），温控诱导目的蛋白表达，仅Cop8蛋白表达。通过优化HD、CAF1密码子后重新构建至原核表达载体pET30a中，并分别转化到宿主菌Rosetta（DE3）和BL21（DE3）中。0.25 mM IPTG15℃下诱导表达目的蛋白16 h，3 L表达蛋白菌体通过超声破碎、包涵体的洗涤、溶解、变性NI-IDA柱纯化、透析复性后，经SDS-PAGE、Western blotting、Bradford检测，获得活性HD、CAF1和Cop8重组融合蛋白，多步纯化后获得浓度为0.476 mg/mL、纯度高达95%的Cop8蛋白；0.295 mg/mL、纯度90%的HD蛋白和0.213 mg/mL、纯度为90%的CAF1蛋白。 采用等温滴定技术，以ChIFN-γ蛋白为配体，研究ChIFN-γ蛋白与HD蛋白、Cop8蛋白和CAF1蛋白的互作关系。结果显示：ChIFN-γ蛋白与HD蛋白的解离常数0.168μM，ChIFN-γ蛋白与Cop8蛋白的解离常数0.269μM，ChIFN-γ蛋白与CAF1蛋白的解离常数为0.781μM，ChIFN-γ蛋白分别与HD蛋白、CAF1蛋白和Cop8蛋白之间均有互作。 综上所述，转ChIFN-γ烟草的抗虫机制可能是ChIFN-γ作用于HD、CAF1和Cop8引起其蛋白活性或构象的改变，直接或间接导致JA、SA或ABA调控的防御相关基因作用，并最终引起植物的抗虫反应。