粉防己碱通过细胞内外途径诱导骨肉瘤U2-OS细胞和MG-63细胞凋亡的实验研究

来源 :浙江大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hysywlp2007
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目的:  探究粉防己碱诱导骨肉瘤U2-OS细胞和MG-63细胞凋亡的机制和临床实用价值。  材料和方法:  1.用MTT法测定粉防己碱抑制骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63的增殖情况。  2.用电子显微镜观察粉防己碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡的情况。  3.用细胞流式法测定粉防己碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡的情况。  4.半胱天冬酶活性测定粉防己碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡后caspase-3和caspase-8的活性。  5.用western blot分析粉防己碱诱导骨肉瘤细胞U2-OS和MG-63凋亡后凋亡蛋白的变化。  结果:  1.粉防己碱诱导骨肉瘤细胞凋亡具有剂量和时间依赖性,粉防己碱24h的IC50在骨肉瘤细胞MG-63和U2-OS分别为13.36μM和9.98μM。  2.粉防己碱诱导骨肉瘤凋亡在电镜下显示细胞皱缩,核固缩,核碎裂,染色质凝聚和细胞质空泡,同时流式细胞仪也显示有细胞凋亡特征,半胱天冬酶活性测定显示caspase-3活性和caspase-8活性显著升高。  3.western blot分析显示促凋亡蛋白Bid和Bax显著提高,抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-xL显著下降,同时cytochrome-c和Apaf-1显著提高。  结论:  1.粉防已碱诱导骨肉瘤凋亡具有剂量和时间依赖性。  2.粉防己碱通过细胞内外途径诱导骨肉瘤U2-OS细胞和MG-63细胞凋亡。
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