【目的】：检测乳腺癌细胞系MCF-7（ER+）和MDA-MB-231（ER-）经不同浓度的1,25二羟基维生素D₃(1,25（OH）₂D₃处理后细胞增殖、周期、凋亡的变化，并且研究了1,25（OH）₂D₃与他莫昔芬（TAM）联合使用对ER不同表达状态乳腺癌细胞系的影响。【方法】：选用不同浓度10×10-7mol/L、5×10-7mol/L、10×10-8mol/L的1,25（OH）₂D₃、1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组处理生长于对数生长期的人乳腺癌细胞系MCF-7、MDA-MB-231，采用四唑氮蓝比色（MTT）法检测细胞增殖，计算两细胞系的抑制率；使用流式细胞仪检测加入不同浓度1,25（OH）₂D₃及1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组，于24h、48h、72h三个时间点作用后的MCF-7、MDA-MB-231细胞周期及凋亡率状况。【结果】：1.MTT法示不同浓度1,25（OH）₂D₃处理MCF-7、MDA-MB-231可产生抑制作用，并且随着药物浓度和作用时间的增加，所产生的抑制作用也越强，差异具有统计学意义（P＜0.05），但对MDA-MB-231抑制作用较弱，表明1,25（OH）₂D₃对MCF-7具有明显的抑制作用，且呈时间-剂量依赖性；1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组处理MCF-7、MDA-MB-231均可产生抑制作用，并且随着药物浓度和作用时间的增加，所产生的抑制作用也越强，其抑制率与单药组相比差异具有统计学意义（P＜0.05），表明1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组对MCF-7、MDA-MB-231具有更显著的抑制作用，且呈时间-剂量依赖性。2.不同浓度1,25（OH）₂D₃作用在三个时间点（24h、48h、72h）的MCF-7、MDA-MB-231细胞周期，有明显变化，主要呈现为G₁期细胞比例上升，与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05），但MCF-7的G₁期细胞比例上升高于MDA-MB-231的G₁期细胞上升比例；1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组，作用在三个时间点（24h、48h、72h）的MCF-7和MDA-MB-231细胞周期亦主要表现为G₁期细胞比例上升，与单药组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。3.不同浓度1,25（OH）₂D₃作用在三个时间点（24h、48h、72h）的MCF-7、MDA-MB-231早期细胞凋亡率升高，与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05），但MCF-7较MDA-MB-231早期细胞凋亡率升高更明显，两细胞系在相同药物浓度、相同时间点的凋亡情况进行对比，差异有统计学意义（P＜0.05）；1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组作用在三个时间点（24h、48h、72h）的MCF-7和MDA-MB-231均出现早期细胞凋亡率升高，与单药组相比差异有统计学意义（P＜0.05）。【结论】：1.1,25（OH）₂D₃对人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231均有明显抑制作用，且呈剂量-时间依赖关系,细胞分裂主要停滞于G₁期，并出现早期凋亡。2.1,25（OH）₂D₃+TAM联合用药组对人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231均有明显抑制作用，并且和细胞周期、凋亡有关，且与单药组相比，联合用药组对人乳腺癌细胞株MCF-7、MDA-MB-231抑制作用更明显，更易诱导人乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231凋亡。