研究背景：感染性腹泻是人类最常见的疾病之一,是由细菌、病毒、原虫等多种病原体所引起的、以腹泻症状为主并广泛存在并流行于世界各地的肠道传染病,也是当今全球性重要的公共卫生问题,位居三大传染病死亡原因之一,尤其在儿童中更是一种常见病和多发病,是导致儿童死亡的两大病因之一。特别在发展中国家,腹泻是导致儿童死亡的主要原因。《2003年世界卫生报告》中披露,发展中国家感染性腹泻导致儿童死亡达156.6万人,占死亡人数的15.2%,居死因第三位。在我国感染性腹泻的发病率居所有传染病之首。目前,病毒已成为感染性腹泻的重要病原体。1972年发现诺瓦克病毒后,已相继发现和确立引起腹泻的病毒有呼肠孤病毒科(轮状病毒)、腺病毒(肠腺病毒)、杯状病毒科(诺如病毒和扎幌样病毒)、星状病毒科(星状病毒)和冠状病毒科的成员。轮状病毒(Rotavirs, RV)是婴幼儿腹泻的最主要病因之一,根据抗原性的不同将轮状病毒分为7个组(A-G)。轮状病毒感染常无症状,有症状感染的潜伏期为1-3天,病程常5-7天,主要临床表现是发热、频繁的呕吐、水样腹泻、轻度失水和酸中毒。据报道,RV肠炎好发于6-24个月的婴幼儿。在气候随四季变化的地区,RV感染的高峰季节随时间和区域不同而有所变动,多发生在寒冷干燥的秋冬季节,在终年炎热的地区全年均可发生,亚热带地区婴幼儿RV腹泻多发生于秋冬季,流行高峰在10-12月,而春季3-5月份又可有一小高峰,突然的环境改变亦可能影响流行,世界各地均有散发和流行的报道。国内外大量研究表明,诺如病毒(Norovirus, NVs)是仅次于RV导致人类急性非细菌性胃肠炎(acute gastroenteritis, AGE)的重要病原体,NVs主要通过粪-口传播,是导致食源或水源性急性腹泻的主要病原,世界范围内引起低龄儿童急性病毒性胃肠炎的主要病原,同时也是造成包括学校、家庭、旅游区、医院、食堂、军队的爆发性胃肠炎流行的重要病原,对社会生产力产生巨大破坏力,其地位仅次于RV。该病毒的特点是发病率高、致病剂量低和抵抗力强。腺病毒(Adenovirus, AdV)在儿童腹泻标本中的检出率虽不如RV高,但近两年随着对AdV的了解越来越深入,检测方法不断增加,商品化的检测试剂盒越来越快速简便,各国对AdV引起的儿童腹泻越来越重视。世界大部分地区均有星状病毒(Astrivirus, AstV)感染的报道,已证实它是引起婴幼儿、老年人及免疫低下者腹泻的重要病原之一。资料显示AstV成为婴幼儿病毒性胃肠炎的第2或第3位病原体。AstV感染常见于秋冬季,多为散发,亦可在医院、幼儿园、老人院、学校和军队引起爆发流行。然而,随着我国城市化进程和经济建设的发展,大量外来人口融入大城市,使得城乡结合部、城中村等经济条件相对落后、人员构成复杂、流动性大的地区腹泻病的情况不容乐观。由于城市流动人口存在流动性强、知识水平低、经济条件差等问题,整体上影响了城市流动人口的卫生保健服务状况。研究目的：1.了解广州市某社区2010-2011年流动人口病毒性腹泻RV、NVs、AdV和AstV感染状况、临床表现及流行病学特征；2.了解该地区病毒性腹泻中NVs、AdV和AstV基因型别,探讨流动人口中三种病毒的流行优势毒株；3.丰富南方病毒感染性腹泻的流行病学资料,为流动人口病毒性腹泻的防治提供一定的参考依据。研究方法：1.标本来源：收集2010年5月～2011年12月期间在广州市白云区某社区卫生服务中心就诊的383例流动人口腹泻患者粪便标本、人口学资料、临床及流行病学资料。2.标本处理方法：每份粪便标本2g,分别各加2mlPBS,震荡混匀,分装后-80℃保存备用。3.标本病毒检测方法：利用RT-PCR和PCR方法,用引物JV12Y/JV13I、 AD1/AD2和Mon269/Mon270分别对所有标本进行NVs、AdV和AstV感染的检测,对PCR阳性产物进行纯化回收、测序,应用BLAST将测序结果在GenBank上寻找各阳性株的同源序列,使用MEGA5.0生物软件进行序列的相似性比对,分析NVs、AdV和AstV的基因型别,判断NVs、AdV和AstV的流行优势毒株。4.统计分析方法：运用统计软件SPSS13.0对收集的患者资料进行统计分析,采用描述性分析,计数资料单因素分析采用卡方检验,多因素分析运用logistic逐步回归,检验水准α为0.05。结果：1.人口学资料：2010年5月～2011年12月共收集广州市某社区腹泻患者粪便标本和问卷共383分。检测情况：5岁以下儿童占90.9%(348/383),来自广东省(除广州市外)其他地区、湖南和江西等周边地区。流动儿童其监护人文化水平较低,以中学水平为主,占89.7%(323/383),多数监护人为无业。2.病毒性腹泻流行病学特征：病毒性腹泻在监测期内均可发生,于秋冬季节病例较多,感染高峰出现在10、11月,但8月出现小高峰；4种病毒的阳性病例为214例,检出率为55.9%(214/383),混合感染率为10.4%(40/383)；主要感染5岁以下儿童,占94.4%(202/214)；其中,男性患者139例,女性75例,男女患者比例为1.85：1。3. RV、 NVs、AdV和AstV的检测结果和流行病学特征：RV、NVs、AdV和AstV的检出率分别为43.1%(165/383)、10.7%(41/383)、7.0%(27/383)和6.0%(23/383),四种病毒阳性检出者年龄均主要集中在5岁以下,年龄组间和性别间各种病毒的检出情况差异无统计学义,RV感染高峰发生在秋冬季,NVs和AdV的高峰均显示在温度较高的夏季,而AstV在2010年5月-2010年12月期间,8月检出率最高,2011年全部AstV感染均发生在秋冬季(10月-12月)。4.无病毒检出组(A组)和病毒检出组(B组)相关分析：单因素分析显示,A和B两组在患者职业(Fisher检验,P=0.032)和文化程度(Fisher检验,P=0.034)方面差异有统计学意义,表明感染性腹泻主要感染学龄前儿童；两组的粪便量()(χ2=5.496,P=0.019)、粪便性状(Fisher检验,P=0.007)、腹泻方式(χ2=9.296,P=0.026)、食欲(χ2=11.968,P=0.001)及乏力(χ2=6.647,P=0.010)情况等临床表现方面差异有统计学意义；而其他人口学资料、临床表现和流行病学接触史等方面差异无统计学意义。5. NVs、AdV和AstV的序列分析结果：383份粪便标本中,共检出NVs41例,系统进化树和相似性分析显示：以GII-4型为主(38例),其中35株为GII.4-2006b亚型、2株为GII.4-2006a亚型、1株为经典GII-4型,另外分别为GII-6、GⅡ-14和GI-2型；检出27株AdV,系统进化和相似性分析显示：16株为AdV41型,其中2株为AdV41型GTC1型,14株为AdV41型GTC2型,AdVl、2和12各检出两株,AdV3和AdV7各检出1株,AdV31检出3株；而检出23株AstV均为AstV-1.结论：1.监测情况显示：腹泻患者或患者家属(14岁以下患儿家属)文化层次较低,以中学文化水平为主,符合流动人口整体文化程度较低的趋势。2.病毒性腹泻的检出率为55.9%(214/383),该病全年均有散发,发病高峰在秋冬季,但是夏季有小高峰出现；两种及两种以上病毒混合感染较常见,检出率为10.4%,患者主要是2岁以下婴幼儿。混合感染是否会加重病情,是应该受到关注的问题。3.病毒为流动儿童腹泻的重要病因,其中轮状病毒是最主要的病原体,其次依次为NVs、 AdV和AstV。 RV以秋冬季高发；NVs夏季为感染高峰,NVs GⅡ.4基因型为广州流动人口NVs感染的流行优势毒株,与我国国内情况相同。其中变异株GII.4-2006b38株、GII.4-2006a2株,而GII.4-2006b曾引起2007年后世界范围内多个国家腹泻疫情大量增加,我国较多地区均已检测到2006b,但未见2006a相关报道,本次研究检出两株NVs2006a引起的腹泻,显示2006a亚型在我国境内也有发病,应增加相关研究。此次研究中夏季较多AdV感染,表明AdV41型仍为我国腺病毒感染腹泻的主要流行毒株,同时存在其他多个AdV型别的散在感染,但并未见AdV40型感染。2010年AstV感染主要发生在夏季,而2011年则全部发生在秋冬季节,AstV阳性均为AstV-1型,显示AstV-1为广州流动人口AstV感染的流行优势型别。4.无病毒检出组(A组)和病毒检出组(B组)在患者职业和文化程度方面差异有统计学意义,说明主要为学龄前儿童,显示腹泻病原体主要感染年龄较小儿童；两组的粪便量、粪便性状、腹泻方式、食欲及乏力情况等临床表现方面差异有统计学意义,表现为病毒检出组患者粪便量较无检出组偏多,主要为水样便或蛋花样便,并对患者食欲影响较大,伴有乏力,因此对病毒感染患者尽早进行对症支持治疗,防止因失水而加重病情。