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目的VEGF-D是一种淋巴管生长因子，能够诱导淋巴管生长并促进肿瘤淋巴道转移。本实验拟用VEGF-D基因转染Lewis肺癌细胞，并以筛选得到的高表达VEGF-D基因的肿瘤细胞接种动物，建立一种高转移和早期转移的小鼠淋巴结转移动物模型。方法以RT-PCR从小鼠胚胎组织中扩增VEGF-D基因，经U-A克隆、酶切鉴定及测序得到完整的序列后，亚克隆并构建pcDNA3.1(+)真核表达质粒；以含有VEGF-D基因的真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞，通过体外G418抗生素筛选得到高表达VEGF-D的肿瘤细胞克隆；用这种高表达VEGF-D的肿瘤细胞分别接种于小鼠后肢肌肉、皮下和足垫，观察肿瘤淋巴道转移的情况。结果酶切鉴定及测序证实扩增的VEGF-D序列与Genebank中报道的序列完全相同。用构建的真核表达质粒转染Lewis肺癌细胞，体外经G418筛选、RT-PCR和westernblot分析得到高表达VEGF-D基因的肿瘤细胞克隆。以高表达VEGF-D的肿瘤细胞接种小鼠，动物实验结果显示，与对照组相比，转染VEGF-D基因的肿瘤细胞生长显著加快，肿瘤组织中血管和淋巴管明显增生，肿瘤在早期就会发生转移，且淋巴结转移率显著高于对照组。结论VEGF-D能够诱导肿瘤内淋巴管生长以及促进肿瘤淋巴结转移。以高表达VEGF-D基因的肺癌细胞建立早期转移和高转移的小鼠淋巴结转移模型的实验方法是可行的。