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目的通过检测miR-331-3p在胰腺癌(PC)病人的血浆、手术切除的癌组织、PC细胞系中的表达,阐述miR-331-3p对PC细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响及潜在的分子机制。方法1.征集5种人PC细胞系及1种正常胰腺导管上皮细胞系;征集44例PC病人及23例健康对照人群新鲜血浆标本;征集17对PC手术病人的癌组织及邻近癌旁组织标本;应用miRNA microarray手段检测PC病人血浆中差异性表达的miRNA;利用qRT-PCR及原位杂交技术检测以上临床标本中miR-331-3p的相对表达水平。2.应用脂质体转染技术将miR-331-3p inhibitor转染PANC-1和MIAPaCa-2细胞,应用CFSE、克隆形成、划痕、Transwell等技术检测转染后PANC-1和MIAPaCa-2的增殖、迁移与侵袭能力;Western blot检测转染后PANC-1细胞E-cadherin、N-cadherin 及 Vimentin 的表达情况。3.应用生物信息学技术预测miR-331-3p的靶基因,并用luciferasereporter gene系统验证miR-331-3p与ST7L的靶向关系;qRT-PCR、免疫组化、Western blot技术检测ST7L的表达。4.应用脂质体转染技术将ST7L过表达质粒、miR-331-3p mimic及两者一起转染PANC-1细胞,应用CFSE、克隆形成、划痕及Transwell实验技术检测转染后PANC-1的增殖、迁移与侵袭能力;Western blot检测转染后PANC-1细胞 E-cadher.in、N-cadherin 及 Vimentin 的表达情况。结果1.miRNA基因芯片结果显示miR-331-3p在PC中高表达;PANC-1、MIAPaCa-2、AsPC-l、BxPC-3、SW1990 的相对表达量(2.53±0.38,3.14±0.74,2.75±0.54,3.20±0.49,2.69±0.95)明显高于正常胰腺导管上皮细胞H6C7;miR-331-3p在PC病人血浆中的表达量(7.15±0.95)显著高于健康对照(3.61±0.72);手术之后的PC病人血浆miR-331-3p的相对表达量(3.75±0.72)比手术之前(8.36± 1.66)要明显减少;miR-331-3p在新鲜癌组织中的相对表达量(7.40±5.18)显著高于对应癌旁组织(3.41±3.82);原位杂交结果显示miR-331-3p在癌组织中的表达量(6.6± 1.85)高于对应癌旁组织(4.83±2.29);高表达miR-331-3p与PC晚期和远处转移有关。2.CFSE 结果显示,miR-331-3p inhibitor 组 PANC-1 和 MIAPaCa-2 的增殖指数(9.37±0.43,10.51 ± 1.22)明显低于对照组(14.56± 1.74,17.49±0.81),克隆形成实验显示miR-331-3p inhibitor组PANC-l和MIAPaCa-2的克隆形成率(0.63±0.04,0.46±0.07)明显低于对照组;相比于对照组,miR-331-3p inhibitor 组 PANC-1 和 MIAPaCa-2 的伤痕愈合率(0.40±0.10,0.45±0.05)显著减低;miR-331-3p inhibitor组PANC-1和MIAPaCa-2的迁移细胞数(272±33,149±23)及侵袭细胞数(125±31,84±12)相比于对照组(554±68,368±43)(230±37,196±22)均显著降低。以上结果表明miR-331-3p inhibitor能抑制PANC-1和MIAPaCa-2的增殖、迁移及侵袭能力。3.Bioinformatics技术预测ST7L是miR-331-3p的候选靶基因,报告基因技术验证 miR-331-3p 直接靶向作用 ST7L 3’-UTR;qRT-PCR、Western blot 和免疫组化结果表明ST7L与miR-331-3p的表达负相关。4.ST7L能部分削弱miR-331-3p对PANC-1的增殖、迁移及侵袭作用。结论miR-331-3p在PC中的表达水平上调,miR-331-3p可通过靶向抑制ST7L增进PC细胞的增殖、迁移及侵袭能力,提示miR-331-3p可作为PC非侵入性生物标志物及为PC的临床治疗提供新思路。