目的分离小鼠骨髓来源的原代树突状细胞;观察加味三妙丸(MSMP)对尿酸钠(MSU)晶体诱导的小鼠骨髓细胞来源的树突状细胞(BMDCs)中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α释放的特点、规律,揭示加味三妙丸对尿酸钠晶体诱导的BMDCs凋亡的影响;检测加味三妙丸对 BMDCs 中与 NLRP3 炎性体轴有关的 NLRP3、ASC、pro-caspase-1、pro-IL-1β蛋白表达和pro-caspase-1 mRNA的调控作用。方法流式细胞分析术(FCM)检测BMDCs细胞表型CD86的表达率,MTT法检测不同浓度的加味三妙丸、秋水仙碱、MSU、LPS对细胞活力的影响作用,未成熟BMDCs分成LPS组、LPS+MSU组、秋水仙碱组(100ng/mL)、加味三妙丸低剂量组(50μg/mL)、加味三妙丸中剂量组(100μg/mL)、加味三妙丸高剂量组(300μg/mL)。均使用终浓度为1μg/mL的LPS处理,置于5%CO2,37℃孵育3h后,除LPS组外,其余加入MSU晶体,终浓度为100μg/mL,给药组加入相应浓度的药物,置于5%CO2,37℃孵育21h。ELISA测定细胞培养液中炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平,Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测各组细胞凋亡情况,荧光定量PCR测定pro-caspase-1 mRNA的表达情况,Western blot 法检测 NLRP3、ASC、pro-caspase-1、pro-IL-1β蛋白质表达水平。结果①通过比较去除未贴壁细胞的时间,小鼠品种,小鼠性别,得出从雄性C57BL/6小鼠分离骨髓细胞,于培养48h后去除未贴壁细胞,加入新鲜完全培养基继续培养,隔天加液,第7天检测CD86的表达率最高;②通过MTT法检测得出加味三妙丸在浓度300μg/mL以下安全,秋水仙碱的细胞毒性大,LPS和MSU在浓度1μg/mL和100μg/mL以下安全,各实验组处理对细胞凋亡无显著影响;③与LPS组相比,LPS+MSU组炎性因子IL-1β、TNF-α释放显著增加(P<0.05),pro-IL-1β和ASC蛋白质表达水平上调,pro-caspase-1和NLRP3蛋白质表达水平没有差异④与LPS+MSU组相比,加味三妙丸组显著降低炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α释放水平(P<0.05),降低pro-IL-1β、ASC蛋白质表达水平,pro-caspase-1、NLRP3蛋白质表达水平无差异。结论加味三妙丸对MSU诱导的BMDCs急性痛风模型NLRP3炎性体轴有干预作用,降低炎性因子的释放水平,在治疗痛风方面有很大潜力。