论文部分内容阅读
鲣鱼和鲐鱼是我国重要的中上层经济鱼类，体内含有丰富的蛋白质，氨基酸含量相当高，尤其是组氨酸。而组氨酸极易被一些酶类（组氨酸脱羧酶）分解而产生组胺。本文以鲣鱼和鲐鱼原料为研究对象，从中分离产组胺微生物，对它们生物学特性进行了初步研究，并通过生理生化和16S rDNA序列分析进行菌种鉴定；并进一步研究了壳聚糖和溶菌酶对产组胺菌抑菌作用的初步研究；研究结果如下。从鲣鱼中分离到两株产组胺菌分别记为J2和J4，经生理生化和16SrDNA序列分析，初步判断为蜡状芽孢杆菌；从鲣鱼中分离到4株产组胺菌分别记为T4、T5、T6和T9，在组胺发酵培养基中其组胺产生量在164.1-466.1mg/100mL，经生理生化实验和16SrDNA初步判定为变形杆菌属细菌。以分离到的产组胺菌株为研究对象，研究了环境因素（温度、pH）对其细菌生长及组胺产生的影响。结果表明：菌株J2和J4的最适生长温度均为30℃，其生物量分别达到12.67logCFU/mL和12.71logCFU/mL；最适pH分别为7和6，其最大生物量分别达到10.32logCFU/mL和10.39logCFU/mL。菌株J2和J4产组胺最适温度分别为25℃和30℃，组胺产生量达到5.49mg/L和12.47mg/L；最适产组胺pH为5条件下，组胺产生量分别达到9.86mg/L和12.02mg/L。菌株T4生长最适温度为20℃，最大生物量为11.75logCFU/mL，最适产组胺温度也是20℃，此时最大组胺产生量为491.1mg/100mL;最适生长pH为7，此时有最大生物量11.32logCFU/mL，最适产组胺pH也为7，且有最大组胺产量465.3mg/100mL。以分离到的产组胺菌株J2和T4为研究对象，以电导率、核酸物质泄漏率、钠盐耐受性为指标初步探讨溶菌酶对菌株抑菌机理。结果表明：溶菌酶对菌株J2和T4均有抑制效果。溶菌酶处理的J2和T4菌悬液相对电导率随时间延长而持续增加，24小时后分别达47.5%和49.01%；对照组的菌悬液相对电导率也随着培养时间的增加但上升速度较慢，24小时后仅分别达31.04%和17.08%。经溶菌酶处理的J2菌悬液的核酸物质泄漏率（以OD260为标准）从3小时开始增长，24时后曲线仍陡坡状；T4经溶菌酶处理5小时后OD260急剧增加。J2菌体在溶菌酶最低抑菌浓度作用1小时后，菌体对5%NaCl和7.5%NaCl耐受率分别降为75.67%和60.32%，2小时后分别降到40.61%和29.58%；对T4菌体在溶菌酶最低抑菌浓度作用1小时后，菌体对5%NaCl和7.5%NaCl耐受率分别降为40.67%和27.32%，2小时后分别降到2.38%和0.42%。研究表明，膜通透性的改变可能是溶菌酶导致菌株细胞死亡的主要原因。