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目的:建立检测Beagle犬血浆中美托洛尔血药浓度的超高效液相色谱联用质谱(UPLC-MS)法,并运用此方法对酒石酸美托洛尔在12只Beagle犬体内的药代动力学进行研究。对酒石酸美托洛尔缓释片的缓释性与生物等效性进行评价。方法:取血浆样品1mL,加内标溶液盐酸普萘洛尔甲醇溶液(4.092μg/mL)50μL,涡旋混匀30s后加于活化后的固相萃取小柱,1mL3%的预冷甲醇水溶液淋洗,抽干小柱后用1.5mL预冷甲醇洗涤,收集甲醇洗脱液,20度(室温)下氮气吹干,残留物加入流动相乙腈水溶液(含1%甲酸)50μL涡旋3min,13400g低温离心15min,取上清液5μL进样供 UPLC-MS 分析,色谱条件为:AgilentSB-C18RRHD1.8μm3.O×100mm 色谱柱;乙腈(含0.1%甲酸)/水(含0.1%甲酸)为流动相,采取梯度洗脱;流速为0.5mL-min-1,进样量5μL,质谱条件:气动辅助电喷雾离子化;离子极性:正离子;喷雾电压:3500V;离子检测方式:选择性离子检测SIM;检测对象:美托洛尔[M+H]+,m/z268.19;内标普萘洛尔[M+H]+,m/z260.06。将12只Beagle犬随机分为两组,每组6只,采取双周期双交叉实验,一组先服用酒石酸美托洛尔缓释片(受试制剂T),另一组则服用酒石酸美托洛尔普通片(参比制剂R),服药剂量均为100mg,停药2周后交叉服药,于规定的时间内取血采样,用超高效液相联用质谱(UPLC-MS)法,检测血浆中美托洛尔的浓度。运用Kinetica5.5药代动力学分析软件计算药动学参数与相对生物利用度,利用双单侧t检验90%置信区间法进行生物等效性评价。结果:本实验所建立方法特异性好,血浆中其它杂质不干预测定。血浆中美托洛尔血药浓度在15.56～996.0ng/mL范围内线性关系良好(r=0.9817);定量下限(LLOQ)为15.56ng/ml,实验结果表明本方法准确度高,精密度良好,样品的稳定性实验结果表明样品在-80℃条件下冻存稳定性良好,绝对回收率高。Beagle犬单剂量口服酒石酸美托洛尔缓释片与普通片后,血浆中美托洛尔的Tmax分别为:2.17 ± 0.39h 和 1 ± Oh;Cmax 分别为:223.22 ± 34.03ng/mL 和 811.60 ±119.83ng/mL;t1/2 分别为:6.37 ± 2.49h 和 2.57 ± 0.90h;AUCoO-t 分别为:1157.69 ±189.29ng·h/mL 和 1613.56±158.71ng·h/mL;AUCO-∞分别为:1314.63±213.50ng·h/mL 和1698.34 ± 141.55ng·h/mL;MRT 分别为:8.61 ± 2.13h 和 3.22 ± 0.35h。对相关药动学参数进行分析后得出酒石酸美托洛尔缓释片AUCO-t的90%可信区间没有落在普通片的80%～125%的范围内;Cmax的90%可信区间也没有落在普通片的80%～125%的范围内,Cmax明显减小Tmax明显延长。缓释片相对于普通片的相对生物利用度为72.45%。结论:本实验建立的超高效液相色谱联用质谱(UPLC-MS)法,检测Beagle犬血浆中美托洛尔血药浓度的方法准确度高,灵敏度好,可用于临床上药代动力学的研究,测得酒石酸美托洛尔缓释片与普通片不具有生物等效性,但缓释效果明显。