研究目的探讨皮肤源性诱导式多潜能干细胞(induced pluripotent stem iPS)的制备及体外定向神经分化的机制。研究方法1.体外培养大鼠皮肤来源前体细胞(skin-derived precursors SKPs)并纯化、鉴定。2.构建包装含Ngn2基因质粒的慢病毒载体并用其转染第3代SKPs。3.SKPs分三组:A组为慢病毒载体介导Neurogenin2(Ngn2)基因转染的SKps,B组为空载体慢病毒转染的SKps,C组为未经处理的的SKPs。4.诱导7天后,免疫荧光检测各组细胞神经分化效率的差异。5.Western Blot检测各组细胞神经分化过程中Notch信号通路相关蛋白hes1和Dll1表达水平的差异。研究结果1.皮肤源性iPS可持续稳定传代并表达绿色荧光。2.诱导培养基诱导7天后,免疫荧光结果显示A组神经元标志蛋白阳性细胞率均明显高于B组和C组,结果有均显著统计学差异(P<0.05)。3.诱导7天后,A组细胞Dll1蛋白的表达水平明显高于B组和C组,而Hes1蛋白的表达水平明显显低于B组和C组,结果均有显著统计学差异(P<0.01)。研究结论1.慢病毒介导Ngn2基因转染SKPs,通过细胞程序重排技术,可制备出皮肤源性iPS。2.皮肤源性iPS向神经细胞定向分化的效率明显高于SKPs。3.皮肤源性iPS高神经分化的机制可能通过上调Dll1蛋白水平,下调hes1蛋白水平,抑制了Notch信号通路,从而促进神经分化。