青花菜（Brassica oleracea L. Var. Italica）属十字花科（Cruciferae）、芸薹属（Brassica）、甘蓝种（Brassica species）。青花菜食用部分是其分化花蕾组成的花球及鲜嫩的花茎，不仅风味鲜美，营养也特别丰富，除含有较高的蛋白质及维生素外，还含有β胡萝卜素、吲哚等有利于人体健康的微量元素和抗癌物质。软腐病常发生在青花菜的生长、运输、贮藏等过程，是十字花科蔬菜的主要病害之一，其致病菌为欧文氏胡萝卜亚种。本试验用软腐病病原菌接种青花菜叶片，在接种后0-7h，每小时取一次样，测定其生理指标。取第0h、1h、4h、7h的材料应用cDNA-AFLP技术研究分析青花菜感病过程中差异表达基因，并利用RACE克隆技术克隆获得LRR、WRKY两条基因的cDNA。1、开展了软腐病病程相关的活性氧代谢研究。结果表明，随着感病时间的推移，细胞膜透性、MDA含量呈现上升趋势，SOD、POD呈现先降低后升高再降低的趋势， CAT酶活性变化不大，说明活性氧代谢在青花菜对软腐病病源菌的响应中起到一定的作用。SOD、POD在低浓度时增强青花菜对病原菌的抗性，高浓度时降低青花菜对病原菌的抗性。2、建立了青花菜cDNA-AFLP反应体系，20μL体系各个组分最佳用量为：模板用量为40ng、引物用量为0.4μmol·μL^-1、dNTP用量为0.2mmol·L^-1、Ex-Taq酶用量为0.5U。3、开展了青花菜感病过程中差异表达基因cDNA-AFLP。应用了128对引物，最终获得了102条TDFs，测序成功91个，将这些序列在VecScreen中去载体，在NCBI里进行Blast，比对结果显示：同源性较低的序列5个，来源物种为细菌的序列5个，来源为动物序列的1个，最后得到80个同源性较高的差异片段基因。根据功能的不同，初步将其分为8类：信号转导相关基因、抗病相关基因、生物合成关键酶基因、蛋白质合成与修饰相关基因、逆境响应相关基因、代谢途径相关酶类基因、转录因子以及一些其它未知功能的基因。4、克隆了LRR、WRKY的cDNA。其中LRR基因cDNA全长1235bp，开放阅读框共有903个碱基组成，编码301个氨基酸，在GenBank上登录号为：KC476519，该基因属于R基因，通过对其蛋白结构的预测推测其具为TM结构域、胞外LRR结构域和丝/苏氨酸激酶位点。WRKY基因cDNA全长为1710bp，开放阅读框共有1500个碱基组成，编码500个氨基酸，在GenBank上登录号为：KC476520，该基因属于转录因子，具有WRKY基因的特征序列WRKYGOK。