金针菇“江山一号”营养要素筛选及其液体菌种培养研究

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本文针对沙县金农菌业有限公司提供的金针菇"江山一号"菌株,进行了营养要素的筛选和液体菌种及培养条件的优化研究,并完成了液体菌种与常规固体菌种栽培对比试验。首先,本文对金针菇"江山一号"菌株的rDNA-ITS序列进行分析,并从GenBank中下载国内不同地区主栽金针菇品种的ITS序列,分析"江山一号"与国内主栽金针菇品种的遗传差异;运用单因素实验筛选出了最适合金针菇"江山一号"生长的碳氮源、碳氮比以及生长所需的常量元素、微量元素、维生素,再从三种防腐剂中筛选出了能有效促进菌丝生长的双乙酸钠,然后采用L9(34)型正交实验进一步优化培养基各组分含量,得到一个适合"江山一号"菌株液体发酵的营养配方;在得到营养配方的基础上,以生物量为主要评价指标,通过单因素实验,对培养温度、培养时间、接种量、装瓶量、摇床转速以及初始pH值进行优化,得出了"江山一号"菌株液体菌种的最佳培养条件。最后在沙县金农菌业有限公司进行初步应用,并和传统固体菌种生产进行比较。为推广"江山一号"菌株液体菌种栽培提供参考依据。主要研究结果如下:(1)"江山一号"菌株与国内主栽的金针菇品种都存在一定程度的差异,与其它品种的平均遗传距离为0.008,最大遗传距离为0.017。(2)"江山一号"生长营养要素:最适碳源为面粉,其次为玉米粉;最适氮源为黄豆粉,其次为酵母粉;菌丝在碳氮比30:1的培养基生长速度最快;常量元素中,钾、磷、钙、镁离子能显著地影响金针菇菌丝的生长,其中对金针菇菌丝体生长影响最大的是钾离子;微量元素中锌、铁离子对菌丝生长有促进作用;6种维生素(生物素、核黄素、叶酸、抗坏血酸、硫胺素、尼克酸)对金针菇菌丝体生长影响不显著;促进剂中浓度为0.02%的双乙酸钠能够极显著地促进菌丝生长。(3)经正交实验优化后,"江山一号"生长最佳营养配方为:玉米粉2%、黄豆粉0.1%、酵母粉0.1%、磷酸二氢钾0.15%、双乙酸钠0.02%。(4)"江山一号"液体菌种最适培养条件为:温度25℃、装液量100mL(三角瓶容量250mL)、接种量10%、摇床转速160r/min、培养周期6 d、起始pH 6.0。(5)"江山一号"液体菌种和固体菌种出菇试验对比结果:与固体菌种相比,液体菌种菌丝的萌发时间提前2d左右,菌丝满袋时间提前10 d左右,子实体现蕾时间提前9 d左右。子实体的平均单产量和生物学效率方面,液体菌种均优于固体菌种。
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