百合药材质量影响因素探讨

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中国药典收载的药用百合为百合科植物卷丹Lilium lancifolium Thunb.、百合Lilium brownii F.E.Brown var.viridulum Baker或细叶百合Lilium pumilum DC.的干燥肉质鳞叶。百合作为药食两用的植物,深受人们喜爱。百合性味甘,寒,入心、肺经。具有宁心安神,养阴润肺的功效。临床常用于阴虚肺热,口燥咽干,肺肾阴虚,情志不舒,心烦焦虑、失眠健忘、更年期症候群,神经官能症等症。近年来药理活性研究表明百合具有抗肿瘤、抗抑郁、抗氧化、免疫调节、镇静等作用。本论文对百合主产地的栽培加工技术进行实地调研,并初步建立百合的质量评价体系。利用建立的质量评价体系,通过分析不同产地饮片、鲜品以及自制的烫片、干燥样品的质量差异,为评价百合产地栽培与加工方法的合理性提供科学依据。主要研究内容和结论如下:  1.百合栽培加工技术实地调研。2011年-2012年实地走访了百合的3个主产地:江苏宜兴、安徽霍山、湖南龙山。实地调研发现,传统以江苏宜兴为主产区,已无百合药材供应。而作为百合药材的新兴产区安徽霍山和湖南龙山产量丰富。经调查比较,安徽霍山和湖南龙山百合均采用“深耕畦作,打顶防涝”独特的栽培方式。该方法可有效降低种球病害率,提高产量。还发现安徽霍山和湖南龙山产地加工的百合药材均采用烫片工艺。烫片工艺直接关系到百合药材成品的色泽、形状及化学品质。  2.不同产地百合的质量分析评价。以安徽霍山与湖南龙山百合饮片为实验对象,检测30批百合样品中富含的各类化学成分。采用UPLC-DAD检测6个酚性甘油酯类成分,UPLC-TQ/MS检测12个核苷类成分、20个氨基酸类成分、3个生物碱类成分、3个酚酸类成分,UV检测中性多糖、酸性多糖、总皂苷、总黄酮。本实验所测百合样品均未检测到秋水仙碱,采用加标法可检测到。还检测到百合药材中含有金黄紫堇碱和小檗碱,且小檗碱含量最高可达0.40%。PCA分析结果显示,2个产地百合样品整体上无显著差异。说明百合药材采用烫片工艺是合理的。进一步采用t检验分析,结果表明安徽霍山与湖南龙山样品的酚性甘油酯、黄酮及酚酸类成分存在显著性差异,而总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、核苷、氨基酸、多糖、皂苷及生物碱类成分无显著性差异。建立百合药材UPLC特征图谱,样品相似度在0.833~0.994之间,利用QTOF/MS鉴定出12个酚性甘油酯类成分,其中6个通过对照品对照确认,6个通过质谱信息推测。并发现王百合苷E、王百合苷F、1-O-阿魏酰-3-O-p-香豆酰甘油和l,3-O-二-对香豆酰甘油是其差异性成分。从而推测2个产地在个别样品上的差异可能是加工过程中某个因素的影响,比如烫片时间或烘干温度。利用上述建立的质量评价体系,以江苏宜兴、安徽霍山与湖南龙山百合鲜品为实验对象,测定18批百合样品中富含的各类化学成分。PCA分析结果显示,3个产地百合样品整体上无显著差异。说明百合采用独特的栽培方式“深耕畦作,打顶防涝”是合理的。进一步采用方差分析,结果显示霍山样品的酚性甘油酯、多糖、皂苷及生物碱含量与宜兴、龙山差异显著,龙山的氨基酸与另两组差异显著,宜兴与龙山的核苷含量差异显著,而3个产地的酚酸含量差异显著,黄酮含量无显著差异。利用前文百合饮片特征图谱分析方法,发现3个产地百合酚性甘油酯类成分中王百合苷E、王百合苷F、1-O-阿魏酰-3-O-p-香豆酰甘油、1,3-O-二-对香豆酰甘油的含量差异较大,与百合饮片的分析结果一致。从而推测3个产地在个别样品上的差异可能是栽培过程中某个因素的影响,比如施肥量或打顶时间。  3.产地加工工艺对百合质量的影响。新鲜百合样品分别采用煮制和蒸制2种烫片方法、不同干燥方法(包括热风烘干、微波干燥、远红外干燥和冷冻干燥)进行加工,用以考察不同加工方法对百合各类化学成分含量的影响。利用上述建立的各类成分检测方法,测定不同加工方法处理的样品中各成分含量。结果表明,煮制及蒸制样品中酚性甘油酯、黄酮及酚酸含量与鲜品相比几无变化;但多糖、核苷、氨基酸及生物碱类成分均有不同程度减少。烫片过程:煮5 min~8 min和蒸8 min~10 min样品不仅外观色泽较佳,而且各类成分含量较高;干燥方法:60℃~80℃烘干和冷冻干燥法较好。结论:烫片是百合干加工过程中必不可少的环节;确定最佳工艺条件为:烫片:煮5 min~8 min,干燥:60℃~80℃烘干或冷冻干燥。
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