本试验对课题组前期研究分离的7株呼和浩特地区试验酵母菌进行发酵特性的比较研究,从中选择发酵特性较好的优良株作为出发菌株进行原生质体融合,进而选育出具有优良性能的菌株。首先对7株试验酵母菌进行了生物学特性分析,研究结果表明菌株A和B发酵特性突出,能在糖浓度为50%、温度为43℃、pH为2、SO2浓度为350mg/L、酒精度为16%(v/v)的发酵基质中生长繁殖。菌株A和菌株B的原生质体形成和再生条件研究结果显示,在28℃下,以培养6h的单倍体预处理20min,0.2g/L的蜗牛溶菌酶37℃下酶解,用山梨醇作为渗透压稳定剂,菌株A和B的原生质体形成率分别为98.11%和97.24%,再.生率分别为17.09%和 15.42%。70℃下热灭活40min的菌株B的原生质体和紫外下灭活120s的菌株A的原生质体进行融合,得到196株融合子,从中选取个体饱满、直径较大的菌落55个,经初筛得到10株发酵力较好的融合子。进一步进行复筛和融合子遗传稳定性试验,获得一株发酵效果略好于出发菌株的融合子R8,其CO2总失重为13.87g,残糖量13.7g/L,酒精度5.1(v/v)。对选育出的优良株R8进行26S rDNAD1/D2序列分析,确定了菌株R8为Claavispora lusitaniae(葡萄牙棒孢酵母)。