论文部分内容阅读
莲子心是睡莲科莲属莲(Nelumbo nucifera Gaertn.)成熟种子中的干燥幼叶及胚根,是我国一种传统中药材。莲在我国大部分地区都有分布,其中湖南湘潭的湘莲、福建建宁的建莲、江西广昌的白莲及浙江武义的宣莲被称为“中国四大历史名莲”。莲子心中含有生物碱和黄酮两大类活性物质,其中黄酮化合物的研究多集中于对总黄酮的提取与含量测定及总黄酮的抗氧化、抗菌活性研究方面。为进一步研究莲子心中的黄酮化合物,首先,本课题以江西广昌莲子心为原料,对莲子心中的黄酮化合物进行提取、纯化及分离;另外,为比较“四大历史名莲”中黄酮化合物的差异,以湖南湘潭、福建建宁、江西广昌、浙江武义四个产地的莲子心为研究对象,对四个产地莲子心中黄酮化合物进行了种类和含量的比较。来自江西广昌的5kg干燥莲子心经过乙醇提取、萃取、大孔树脂柱层析、硅胶柱层析、凝胶柱层析、高效制备液相等分离与纯化方法,从莲子心中分离得到11个化合物,包括8个黄酮化合物及3个其它类型的化合物,即异鼠李素-3-O-芸香糖苷、木犀草素-6-C-葡萄糖苷(异荭草素)、芦丁、芹菜素-6-C-葡萄糖苷(异牡荆素)、木犀草素-7-O-新橙皮糖苷、木犀草素-8-C-葡萄糖苷(荭草素)、槲皮素-3-O-半乳糖苷(金丝桃苷)、槲皮素-3-O-葡萄糖苷(异槲皮苷)、4-羟基苯乙醇、淫羊藿次苷、白蓬叶灵。其中木犀草素-7-O-新橙皮糖苷、金丝桃苷、淫羊藿次苷、白蓬叶灵单体化合物为首次从莲子心中分离得到。这些化合物的分离鉴定,进一步阐明了莲子心中的化学成分,也为单体化合物的活性研究提供了物质基础。以四个著名产地的干燥莲子心为原料,通过溶剂提取法与大孔树脂D101柱层析纯化的前处理方法得到莲子心中的总黄酮;其次,利用高效液相色谱法(HPLC)进行了色谱条件的优化,在优化的色谱条件下,利用高效液相色谱-电喷雾质谱(HPLC-ESI-MS)联用法对莲子心中的黄酮化合物进行鉴定;最后建立了不同产地莲子心黄酮化合物定量分析的高效液相色谱法,并通过分析方法的验证确定了方法的可靠性。结果:20种黄酮化合物在4个产地莲子心中均检测得到,因此,4个产地的莲子心在黄酮组成上无差异,但是,不同产地莲子心在黄酮含量上差异较大,湖南湘潭、福建建宁、江西广昌、浙江武义四个产地莲子心总黄酮含量分别为:1237.62 mg/100g、981.28 mg/100g、1702.03 mg/100g、1628.78 mg/100g,江西广昌白莲的莲子心具有最高的总黄酮含量,并且其总黄酮含量为福建建宁产地莲子心总黄酮含量的2倍。虽然4个产地莲子心在总黄酮含量上差异较大,但是,4个产地莲子心中碳苷黄酮占总黄酮的比例具有相似性,湖南湘潭、福建建宁、江西广昌、浙江武义四个产地莲子心中碳苷黄酮占总黄酮含量比分别为:81.88%、80.43%、82.07%、79.50%。不同产地莲子心黄酮含量的比较,有利于莲子心的质量控制与保证,也为筛选高黄酮含量的莲子心提供一定依据。