【摘 要】
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目的:研究五眼果在一维琼脂凝胶体系、HKC细胞体系和整体动物体系中对草酸钙晶体和草酸钙结石的抑制作用及其机制。方法:1、一维琼脂凝胶体系,采用生物学显微镜观察法对所得的Ca Ox晶体进行表征,采用FTIR法对COM、COD晶体进行定性分析,采用XRD法对COM、COD晶体进行物相分析。2、HKC细胞体系,建立H2O2细胞损伤模型,采用MTT法检测药物对损伤细胞的保护作用,采用比色法检测氧化指标MD
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（81260667）； 广西自然科学基金项目（2011GXNSFA018204）；
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目的:研究五眼果在一维琼脂凝胶体系、HKC细胞体系和整体动物体系中对草酸钙晶体和草酸钙结石的抑制作用及其机制。方法:1、一维琼脂凝胶体系,采用生物学显微镜观察法对所得的Ca Ox晶体进行表征,采用FTIR法对COM、COD晶体进行定性分析,采用XRD法对COM、COD晶体进行物相分析。2、HKC细胞体系,建立H2O2细胞损伤模型,采用MTT法检测药物对损伤细胞的保护作用,采用比色法检测氧化指标MDA含量及抗氧化指标SOD和GSH-Px活性。3、整体动物体系,采用生化法检测24 h尿液、血清中Ox、Ca2+、Cr和BUN含量,采用比色法测定肾组织MDA含量和SOD活性,采用生物学显微镜观察法表征尿液中所得的Ca Ox晶体,采用HE染色法观察肾小管扩张情况和肾小管Ca Ox晶体分布情况,采用ELISA、Western Blot法检测肾组织OPN蛋白表达。结果:1、（1）生物学显微镜观察法,模型组均生成六边形和树枝形COM晶体及蔷薇花状的聚集体;五眼果水总提物均生成四角双锥形COD晶体;石油醚部位生成COM及聚集体,晶体尺寸较模型组大;乙酸乙酯及正丁醇部位生成COM、COD及聚集体,COM尺寸较模型组大;水溶性部位中均生成菱形和两头钝圆的COM,尺寸较模型组小。（2）FTIR法,模型组在1618和1315 cm-1处出现吸收峰,吸收带出现在880和945cm-1处;五眼果水总提物组在1644和1324 cm-1处出现吸收峰,吸收带出现在917 cm-1处;石油醚部位在1618 cm-1和1315 cm-1处出现吸收峰,吸收带出现在880 cm-1处;乙酸乙酯部位在1620和1317 cm-1处出现吸收峰,吸收带出现在880和945 cm-1处;正丁醇部位在1618和1317 cm-1处出现吸收峰,吸收带出现在880和945 cm-1处;水溶性部位在1618和1317 cm-1处出现吸收峰,吸收带出现在880 cm-1处。（3）XRD法,模型组出现COM的（020）和（（?）202）晶面;五眼果水总提物出现COD的（200）,（211）,（002）,（103）,（213）和（411）晶面;石油醚部位出现COM的（（?）101）,（020）,（（?）202）和（130）晶面;乙酸乙酯部位出现COD的（200）,（211）,（411）,（103）,（130）,（110）和（213）晶面,同时出现COM的（020）,（（?）101）和（（?）202）晶面;正丁醇部位出现COM的（（?）101）,（020）,（（?）202）,（130）晶面,同时出现COD的（103）晶面;水溶性部位出现COM的（（?）101）,（020）,（（?）202）,（130）晶面。2、MTT法测定五眼果不同提取部位对HKC细胞的增殖作用发现,五眼果不同提取部位对HKC细胞几乎无毒或无毒,甚至有增殖作用;细胞氧化损伤模型建立的最佳条件为,2 mmol/L的H2O2作用HKC细胞1 h;五眼果不同提取部位干预后,经H2O2损伤的HKC活力增强,其中正丁醇部位对HKC细胞活力的促进作用最强;五眼果正丁醇部位干预后,MDA含量减少,SOD和GSH-Px活力增强。3、五眼果正丁醇部位可明显降低尿Ox、血Ca2+、尿Cr含量水平,促进尿BUN排泄;减少肾脏组织MDA含量,增强SOD活性;可减少Ca Ox晶体的形成,减轻肾小管扩张,抑制OPN表达。结论:五眼果正丁醇部位可抑制COM晶体的形成,促进COD晶体的形成;可增强HKC细胞活力,保护细胞对抗氧化损伤;在体内可通过减少Ca Ox晶体生成,抑制OPN表达而起到预防草酸钙型结石的作用。
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