狂犬病是由狂犬病病毒（Rabies virus,RABV）感染引起的一种人兽共患传染病,对全世界的公共卫生安全构成了严重威胁并且感染后缺乏有效的治疗方法,而狂犬病早期诊断将为其临床治疗奠定基础,但目前仍缺乏足够灵敏的方法进行RABV感染的早期检测。近来研究报道,基于CRISPR-Cas13a与重组酶聚合酶扩增（Recombinase polymerase amplification,RPA）的一种新型检测方法在检测寨卡、登革热、流感等病毒时,具有极高的灵敏性,其检测限度低至单个拷贝/微升。为了解决狂犬病的早期诊断问题,本研究使用CRISPR-Cas13a核酸检测方法在RABV的大鼠感染模型中开发早期诊断方法。此外,本研究引入基于荧光素酶系统的小动物活体成像方法用于指示感染RABV大鼠体内病毒分布情况。作为一种高度敏感的核酸检测方法,CRISPR-Cas13a对RABV基因组RNA和ss RNA的检测限低至单拷贝/微升。CRISPR-Cas13a通过结合HUDSON样品处理方法（Heating unextracted diagnostic samples to obliterate nucleases）,得以直接检测感染大鼠脑脊液中的病毒。其次,通过反向遗传技术构建了表达荧光素酶te Luc的重组狂犬病病毒。该重组病毒的复制不受te Luc基因插入的影响,且te Luc蛋白的表达呈现病毒剂量依赖性。使用CRISPR-Cas13a以及小动物活体成像方法检测重组病毒r B2c-te Luc感染的大鼠与小鼠体内病毒分布,发现CRISPR-Cas13a最早能检测到感染后第3天脑脊液中的病毒,同时该早期诊断结果也通过活体成像技术得到了验证。此外,RABV是典型的嗜神经病毒,而血脑屏障（Blood-brain barrier,BBB）阻碍了外周的中和抗体和一些抗病毒药物进入中枢神经系统（Central nervous system,CNS）清除感染的RABV。因此除了早期诊断以外,药物向CNS的递送、药物的靶向特异性及其抗病毒效果仍是狂犬病临床治疗的难点。基于近红外光谱的光热治疗（Photothermal therapy,PTT）由于使用金纳米棒（Gold nanorods,Au NR）能够吸收近红外光从而产生热能,进而被广泛应用于体内的光热治疗研究中。为了解决狂犬病感染后治疗的难点,本研究构建了偶联DNA适配体和狂犬病病毒G蛋白多肽（RVG）的介孔二氧化硅纳米金棒RVG-Apt-Silica Au NR用于开发光热治疗方法。核酸适配体为ss DNA或ss RNA（通常短于100 nt）特异性靶向探针,其识别物包括活细胞,蛋白质与化合物。通过在纳米金棒（Au NR）表面偶联修饰DNA适配体,使其能够在体内和体外特异性靶向RABV感染细胞表面的RABV-G蛋白。其次,Au NR表面共价修饰了多肽RVG以提高Au NR向CNS中递送的效率。通过活体成像以及冰冻切片技术,发现尾静脉注射后,Au NR能够从外周血进入CNS,并且能够与脑内受感染细胞表面RABV-G蛋白产生共定位。为了检测该PTT能否有效清除病毒,在体外实验中发现经过5 min光热之后,RABV感染细胞上清液中的活病毒被全部灭活,细胞内部的病毒滴度降低了约100倍。在体内实验中,PTT处理的小鼠存活60%,进一步通过RNA定量检测和免疫组化实验检测体内实验中小鼠脑内的病毒水平。结果表明与病毒对照组相比,PTT处理组小鼠脑内的病毒基因组RNA水平和病毒载量均显著降低。这说明该PTT在RABV感染后治疗中能够有效的清除狂犬病病毒。本研究开发了基于CRISPR-Cas13a的狂犬病早期诊断技术,为及时的临床治疗奠定了基础;同时开发了基于适配体偶联RVG-Apt-Silica-Au NR的光热治疗在体内和体外均可有效清除狂犬病病毒,这为狂犬病的感染后治疗提供了有益的探索。