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阿尔茨海默症(Alzheimers disease, AD)是一种多因素、致死性神经系统退行性疾病,临床表现为记忆功能减退、认知学习能力下降。目前临床上能够有效治疗AD的药物较少,且多为治疗靶点单一,副作用较多的化学药物,因此从天然药物中开发多靶点治疗、副作用低的新药,已经成为国内外学者的研究热点。
黄藤为防己科天仙藤属植物黄藤(Fibraurea recisa Pierre.)的干燥藤茎,主要成分为以黄藤素和药根碱为代表的异喹啉类生物碱,具有抗炎、抗菌、保护神经、增强免疫力等药理作用,我们课题组首次发现黄藤总生物碱在抗AD方面具有显著的改善作用,且已获得国家授权发明专利。
人参为五加科多年生草本植物人参(Panax ginseng C. A. Mey.)的根和根茎,其主要化学成分人参皂苷在我国用于提高智力方面已有数百年历史,且现代研究表明,人参皂苷对AD具有明显的改善作用。由于AD的多致病因素特性,单一靶点和单一配体的治疗方式不能完全改善AD症状,因此开发多作用靶点、具有协同作用的组合成分的治疗药物为开发抗AD新药提供了全新的方向。
本研究首先以体外乙酰胆碱酯酶抑制活性为指标,采用均匀设计法筛选黄藤总生物碱和人参总皂苷最佳配伍比例,按照最佳比例将二者配伍混合,采用海马内注射Aβ1-42诱导小鼠AD模型,通过行为学检测、组织病理学检查、ELISA、免疫组织化学染色、WesternBlot等技术对比分析单独使用黄藤总生物碱、单独使用人参总皂苷以及二者配伍给药后对AD小鼠行为学、氧化损伤以及神经细胞凋亡影响的差异,结果表明黄藤总生物碱、人参总皂苷单独使用均有抗AD作用,并且人参总皂苷有协同黄藤总生物碱抗AD小鼠氧化损伤和神经细胞凋亡的作用。
接下来本研究将黄藤总生物碱和人参总皂苷按照最佳比例进行配伍使用,将其制成五类新药“参藤胶囊”,制备过程中通过干粉流动性检查和细粉堆密度测定结果,选取0号胶囊进行药物填充,并按药典规定对参藤胶囊进行常规检查,包括水分含量、装量差异和崩解时限等测定。上述检查均符合规定后,对参藤胶囊又进行了质量标准研究,采用薄层色谱法和高效液相色谱法对参藤胶囊中化学成分分别进行了定性和定量鉴别,为参藤胶囊质量标准的建立提供科学依据。
为探讨参藤胶囊安全性,本研究对参藤胶囊进行了小鼠灌胃急性毒性试验研究,检测到小鼠灌胃最大给药量33g/kg,14天内小鼠无一死亡,14d结束后摘取小鼠心、肝、脾、肾、胸腺,测定脏器系数,结果表明参藤胶囊毒性极低,临床应用安全,为参藤胶囊初步安全性评价提供了实验依据。
上述研究结果表明,黄藤总生物碱与人参总皂苷配伍后抗AD作用显著提高,二者为原料制成的参藤胶囊质量稳定、安全性高,临床开发前景广阔。
黄藤为防己科天仙藤属植物黄藤(Fibraurea recisa Pierre.)的干燥藤茎,主要成分为以黄藤素和药根碱为代表的异喹啉类生物碱,具有抗炎、抗菌、保护神经、增强免疫力等药理作用,我们课题组首次发现黄藤总生物碱在抗AD方面具有显著的改善作用,且已获得国家授权发明专利。
人参为五加科多年生草本植物人参(Panax ginseng C. A. Mey.)的根和根茎,其主要化学成分人参皂苷在我国用于提高智力方面已有数百年历史,且现代研究表明,人参皂苷对AD具有明显的改善作用。由于AD的多致病因素特性,单一靶点和单一配体的治疗方式不能完全改善AD症状,因此开发多作用靶点、具有协同作用的组合成分的治疗药物为开发抗AD新药提供了全新的方向。
本研究首先以体外乙酰胆碱酯酶抑制活性为指标,采用均匀设计法筛选黄藤总生物碱和人参总皂苷最佳配伍比例,按照最佳比例将二者配伍混合,采用海马内注射Aβ1-42诱导小鼠AD模型,通过行为学检测、组织病理学检查、ELISA、免疫组织化学染色、WesternBlot等技术对比分析单独使用黄藤总生物碱、单独使用人参总皂苷以及二者配伍给药后对AD小鼠行为学、氧化损伤以及神经细胞凋亡影响的差异,结果表明黄藤总生物碱、人参总皂苷单独使用均有抗AD作用,并且人参总皂苷有协同黄藤总生物碱抗AD小鼠氧化损伤和神经细胞凋亡的作用。
接下来本研究将黄藤总生物碱和人参总皂苷按照最佳比例进行配伍使用,将其制成五类新药“参藤胶囊”,制备过程中通过干粉流动性检查和细粉堆密度测定结果,选取0号胶囊进行药物填充,并按药典规定对参藤胶囊进行常规检查,包括水分含量、装量差异和崩解时限等测定。上述检查均符合规定后,对参藤胶囊又进行了质量标准研究,采用薄层色谱法和高效液相色谱法对参藤胶囊中化学成分分别进行了定性和定量鉴别,为参藤胶囊质量标准的建立提供科学依据。
为探讨参藤胶囊安全性,本研究对参藤胶囊进行了小鼠灌胃急性毒性试验研究,检测到小鼠灌胃最大给药量33g/kg,14天内小鼠无一死亡,14d结束后摘取小鼠心、肝、脾、肾、胸腺,测定脏器系数,结果表明参藤胶囊毒性极低,临床应用安全,为参藤胶囊初步安全性评价提供了实验依据。
上述研究结果表明,黄藤总生物碱与人参总皂苷配伍后抗AD作用显著提高,二者为原料制成的参藤胶囊质量稳定、安全性高,临床开发前景广阔。