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植物胰蛋白酶抑制剂是一种能抑制胰蛋白酶活性的蛋白类物质,在豆类植物中分布广泛。它们不仅能使植物产生抗虫性,还具有抗肿瘤、抗辐射等多种重要的生理功能,是当下研究的热门话题。我国拥有丰富的豆类资源,但对豆类胰蛋白酶抑制剂的研究主要集中于大豆、绿豆等少数几种豆类,急需对其他种属豆类种籽的胰蛋白酶抑制剂进行广泛的筛查。本文选取了15种不同种属和产地的豆类,测定其胰蛋白酶抑制剂活性;并选取了4种菜豆类种籽,测定了胰蛋白酶抑制剂在种籽不同部位的分布情况;对胰蛋白酶抑制剂进行分离纯化,得到胰蛋白酶抑制剂纯品,并测定了其热稳定性。本文首先测定了15种不同种属和产地豆类种籽中胰蛋白酶抑制剂的活性,并选取4个样本,探讨了胰蛋白酶抑制剂在种籽不同部位的分布。研究发现,种属和产地对胰蛋白酶抑制剂的活性均有一定的影响,以大豆属的抑制剂活性最高,其次为菜豆属,再其次为豇豆属。胰蛋白酶抑制剂主要分布在种籽的子叶中,但种胚的比活力均高于子叶。此外,本文依次采用硫酸铵分级沉淀、DEAE-52阴离子交换层析和Sephadex G-100凝胶过滤层析对4种菜豆类种籽胰蛋白酶抑制剂进行分离纯化。实验分别得到分子量约为24.3kDa的小黑芸豆胰蛋白酶抑制剂;分子量为15.6kDa的奶花芸豆胰蛋白酶抑制剂;分子量为11.4kDa和16.7kDa的奶白花芸豆胰蛋白酶抑制剂;以及分子量为10.6kDa,17.8kDa和52.0kDa的大白芸豆胰蛋白酶抑制剂组分。对4种菜豆胰蛋白酶抑制剂热稳定性的研究表明,四者均具有一定的热稳定性,100℃处理60min后,奶花芸豆、奶白花芸豆、大白芸豆和小黑芸豆胰蛋白酶抑制剂的活力分别保持了66.44%,57.81%,50.59%和44.76%。胰蛋白酶抑制剂虽然在豆科植物中分布广泛、种类繁多,但其研究多集中于大豆、绿豆、豇豆等少数几种豆类种籽。近年来有学者开始将研究对象转移到芸豆、饭豆等其他豆科植物上,但其研究多止步于分离纯化及初步的理化性质研究。相信多种豆类种籽中胰蛋白酶抑制剂的深入研究将成为新的研究热点。