油菜核盘菌凝集素基因SSL-6的研究

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菌核病是引起油菜减产以及品质损害的重要病害,菌核病的致病病源菌为核盘菌。为进一步了解核盘菌的致病机理,我们对核盘菌菌核发育过程中菌核表面分泌液滴中的凝集素SSL-6进行研究,以期对核盘菌的致病过程有新的认识。本研究首先对凝集素基因进行了生物信息学分析;从核盘菌菌核中克隆出凝集素基因,构建其植物双元表达载体;通过农杆菌介导转化拟南芥和油菜,并对转基因拟南芥进行了病源菌接种抗性试验。主要的研究结果如下:1、构建了SSL-6氨基酸序列亲缘关系进化树;预测SSL-6蛋白为亲水性的分泌型凝集素,具有真菌凝集素典型的AFL1六叶扇形的三维结构,属于真菌岩藻糖特异性的凝集素。2、从核盘菌未成熟的菌核中克隆出SSL-6基因编码框,并成功构建了pCAMBIA1303-SSL-6双元表达质粒。3、获得了SSL-6过表达的T4代转基因拟南芥纯合子植株,从转录与翻译两个水平确认了转基因的有效性;并证明转SSL-6基因的植株能显著提高对菌核病的抗性。4、成功获得了20多株转SSL-6基因的油菜植株;经过RT-PCR检测,结果表明转基因植株中均有不同程度的SSL-6基因表达。
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