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[目 的]本课题基于TCGA数据库分析并筛选出与前列腺癌相关的长链非编码RNA,并研究其在调节前列腺癌增殖和侵袭转移过程中的作用机制,探寻前列腺癌新的治疗靶点,寻找前列腺癌微创体液诊断特异性高的生物标志物,为前列腺癌的个体化诊治提供新的方案。从而为探索研发新型前列腺癌靶向药物、优化临床治疗方案提供可靠的理论依据。[方 法]1.采用TCGA数据库对52例前列腺癌患者的癌旁正常组织和499例前列腺癌组织进行聚类分析,筛选出显著差异表达的肿瘤相关lncRNA分子;2.体外培养4种前列腺癌细胞系PC3、DU145、22Rv1和LnCaP以及人正常前列腺上皮细胞RWPE-2,分别提取RNA后利用实时荧光定量法检测lncRNA DLX6-AS1在这五种细胞中的mRNA表达量;3.通过核质分离试验检测lncRNA DLX6-AS1在前列腺癌细胞中的定位;4.慢病毒转染前列腺癌细胞系PC3、DU145、22Rv1 和 LnCaP 通过表达 shRNA 下调 lncRNADLX6-AS1后,CCK8细胞增殖活性试剂盒检测lncRNADLX6-AS1敲减对前列腺癌细胞增殖能力的影响,克隆形成实验检测lncRNA DLX6-AS1敲减对前列腺癌细胞存活能力的影响,Transwell小室实验检测lncRNA DLX6-AS1敲减对前列腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响,凋亡试剂盒检测lncRNADLX6-AS1敲减对前列腺癌细胞抗凋亡能力的影响;5.qRT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测lncRNADLX6-AS1敲减对于前列腺癌细胞对EMT相关标志物的影响;6.RNA pull-down和RIP实验捕获并验证与lncRNADLX6-AS1特异结合的功能蛋白。[结 果]1.通过TCGA数据分析后确定lncRNA DLX6-AS1为实验所研究的目的基因;2.PC3细胞mRNA表达量(10.36±0.32)、DU145细胞mRNA表达量(4.59±0.09)、22Rv1 细胞 mRNA 表达量(2.47±0.13)、LnCaP 细胞mRNA表达量(2.70±0.20)均高于人正常前列腺上皮细胞RWPE-2 mRNA表达量(1.00±0.16)(p<0.05);3.核质分离试验结果提示 lncRNADLX6-AS1 主要富集于前列腺癌细胞的细胞质中;4.慢病毒转染前列腺癌细胞系后,CCK8实验结果显示下调DLX6-AS1实验组的在450nm吸光度低于对照组(p<0.05),细胞克隆形成实验显示下调DLX6-AS1实验组的细胞集落数低于对照组(p<0.05),Transwell迁移侵袭实验显示下调DLX6-AS1实验组的侵袭和迁移低于对照组(p<0.05),Annexin V-FITC/PI凋亡实验结果显示下调DLX6-AS1实验组的抗凋亡能力低于对照组(p<0.05);5.qRT-PCR和Western blot实验显示下调DLX6-AS1实验组中snail、twist和Vimentin的mRNA和蛋白表达量均低于对照组(p<0.05),而E-Cadherin、Claudin1和ZO-1的mRNA和蛋白表达量均高于对照组(p<0.05);6.RNA pull-down和RIP实验结果显示plectin蛋白能与lncRNADLX6-AS1特异性结合;[结 论]1.lncRNA DLX6-AS1在前列腺癌细胞系中高表达,可能在前列腺癌中起到促癌基因的作用;2.1ncRNA DLX6-AS1可以促进前列腺癌细胞的增殖、侵袭及转移,而抑制凋亡;3.lncRNADLX6-AS1通过促进EMT过程进而促进前列腺癌的侵袭和转移;4.lncRNA DLX6-AS1可能通过与plectin结合促进前列腺癌的发生与发展,有望成为临床诊断及治疗的潜在新靶点。