玉米芯酶解液培养真菌合成壳聚糖的研究

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进行了以富含纤维素和半纤维素的农副产物玉米芯为发酵底物,以绿色木霉为产酶菌种纤维素、木聚糖复合水解酶的诱导合成,将此酶对10%氨水处理后的玉米芯进行酶水解,以水解液为底物培养真菌(黑曲霉、绿色木霉、米根霉和戴尔根霉),从真菌菌丝体中提取壳聚糖的研究。 纤维素、木聚糖复合水解酶的诱导合成研究表明:碳源和氮源种类、浓度及碳氮比、培养温度、pH等因素对纤维素酶和木聚糖酶的合成都有一定的影响。以经过1%NaOH预处理的玉米芯为主要碳源和诱导物,碳源浓度为20g/L,利用蛋白胨+硫酸铵+尿素为复合氮源,控制碳氮比为5.6,初始pH值为4.8,培养温度28℃时,纤维素酶活力(以CMC酶活计)和木聚糖酶活力分别达到了40.71U/mL和141.32U/mL。 利用所做复合水解酶对预处理玉米芯进行酶水解,当底物浓度为15%(W/V),pH值为4.8,温度为50℃,酶用量30U/g底物时水解效果最好,水解24h后还原糖浓度可达62.3g/L并趋于恒定。 以预处理玉米芯的酶水解产物为碳源,分别对黑曲霉、绿色木霉、米根霉和戴尔根霉进行菌丝体培养提取壳聚糖的研究结果表明:省略浓碱处理过程时,可以从真菌菌丝体中提取壳聚糖,在同样的菌丝体培养和壳聚糖提取条件下,壳聚糖产量以黑曲霉最多。 以酶水解玉米芯为发酵底物,黑曲霉为菌种制备壳聚糖的研究结果表明:当培养液中还原糖浓度为20g/L时,菌丝体培养温度30℃,pH7.0,摇床转速150r/min,培养48h后壳聚糖产量最高,壳聚糖浓度为0.69g/L培养液,此时,菌丝体浓度为8.11g/L培养液,壳聚糖在菌丝体中的含量为8.51%,产品得率为34.5mg壳聚糖/g还原糖。
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