绿茶多酚对小鼠角膜碱烧伤的治疗作用研究

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目的:通过建立小鼠角膜碱烧伤模型,研究绿茶提取物绿茶多酚(Green tea polyphenols, GTP)对C57/BL小鼠角膜碱烧伤的治疗作用。方法:取40只健康的C57/BL雄性小鼠,随机分为对照组和GTP实验组,每组各20只。所有小鼠都用浸润1mol/L氢氧化钠(NaOH)的滤纸片贴敷于左眼角膜中心60s,形成左眼单眼碱烧伤模型。从模型建造当天开始,每日给实验组腹腔注射GTP溶液,对照组腹腔注射等量0.9%生理盐水。每日裂隙灯下观察小鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)生长情况,并拍照,计算新生血管长度、新生血管面积;荧光素钠染色后裂隙灯下观察角膜上皮恢复情况,并拍照,计算角膜上皮恢复率。于碱烧伤后第1、3、7、14天分别处死5只对照组和GTP组小鼠,取眼球做切片,处死的小鼠为随机选取。切片苏木精-伊红(HE)染色观察角膜形态,并对角膜新生血管及炎症细胞进行计数;切片免疫组织化学染色观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)表达情况。结果:1.裂隙灯显微镜观察结果:(1)与对照组相比,GTP实验组角膜新生血管发生较迟、生长缓慢、新生血管长度较短、新生血管面积小;碱烧伤后第3、7、14天新生血管长度及新生血管面积差异均有统计学意义(p<0.05)(2)碱烧伤后第1、3、7、14天,GTP实验组角膜上皮恢复率均优于对照组,第1、3、7天对照组和GTP实验组的角膜上皮恢复率差异有统计学意义(p<0.05)第14天两组间差异没有统计学意义(p>0.05)2.HE染色:(1)碱烧伤后第3、7、14天,GTP实验组新生血管数量都比对照组少,两组间差异有统计学意义(p<0.05)(2)碱烧伤后第1、3、7、14天,GTP实验组炎症细胞计数都比对照组少,两组间差异有统计学意义(p<0.05)3.免疫组化结果:碱烧伤后第7,GTP实验组VEGF表达比对照组低,两组间差异有统计学意义(p<0.05)结论:1.腹腔注射GTP可有效促进碱烧伤后小鼠角膜上皮恢复,抑制角膜新生血管形成,抑制角膜中炎症细胞浸润,减少角膜组织VEGF的表达。2.GTP抑制角膜新生血管可能是通过抑制VEGF的表达来实现的。
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