无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)不仅能引起奶牛乳腺炎及新生儿脑膜脑炎,近年来发现该菌还可引致鱼类脑膜炎及败血症。2010年7月,广州地区罗非鱼暴发以突眼为主要症状的流行病,经鉴定其病原为无乳链球菌。选取无乳链球菌的6种主要毒力基因,包括sip(表面免疫蛋白)、scpB(C5α肽酶)、lmb(层黏连结合蛋白)、bca(α蛋白)、bac(6蛋白)和hylB(玻尿酸酶),对分离鉴定的19株鱼源无乳链球菌、2株人源无乳链球菌及1株牛源无乳链球菌进行PCR检测,比较毒力基因在不同宿主来源的无乳链球菌中的分布。结果显示,6种毒力基因在19株鱼源无乳链球菌中分布无明显差异,部分毒力基因在不同宿主来源的无乳链球菌中分布存在差异。hylB基因在鱼源、人源和牛源无乳链球菌中检出率均为100%；lmb、scpB基因在人源和牛源无乳链球菌中均有检出,而在鱼源无乳链球菌中未检出；bca、bac基因在鱼源无乳链球菌中检出率为100%,在牛源和人源无乳链球菌中未检出。以上结果可以看出,不同宿主来源的无乳链球菌,其毒力基因分布存在差异。将鱼源无乳链球菌GD-001感染7周龄BALB/c小鼠,发现感染小鼠眼球被覆白膜,且出现典型神经症状。每只小鼠腹腔注射5×103cfu/ml的GD-001细菌悬液,平板涂布法检查小鼠在感染后3h、6h、9h、12h、24h,肝脏、脾脏、脑组织和血液中细菌动态分布。感染后3h,仅在肝脏和脾脏中检测到细菌；感染后6h,待检组织样品中均能检测到细菌；感染后24h,在肝脏、脾脏、血液和脑组织中细菌的浓度可达107～108cfu/g。细菌在感染小鼠待检组织中的浓度随攻毒时间的延长而增高,肝脏中细菌浓度在各个检测时间点均比脾脏、脑组织和血液中高。取感染小鼠脑组织做病理切片,可观察到明显的脑炎病变,表现为小胶质细胞增多,海马体及神经纤维受损严重；免疫组化显示,小胶质细胞内明显的抗原着色,海马体及神经纤维处也发现大量抗原。研究表明,无乳链球菌GD-001感染小鼠组织分布广泛,可致小鼠脑炎。为了研究鱼源无乳链球菌对血脑屏障通透性的影响,本试验首先在tranwell细胞培养插两侧接种脑血管内皮细胞bEnd.3和星形胶质细胞M1800,建立体外血脑屏障模型,观察GD-001对体外血脑屏障模型渗滤和通透性的影响；应用AnnexinVI/PI观察脑微血管内皮细胞感染GD-001后的病理表现。结果显示,GD-001能够导致血脑屏障通透性增大,且引起脑微血管内皮细胞初期凋亡,后期坏死,推测鱼源无乳链球菌引起脑微血管内皮细胞凋亡和坏死可能是导致血脑屏障功能损伤,从而引致脑炎的原因之一。