轮状病毒VP6蛋白在转基因本生烟和甜菜中的表达和检测

来源 :中国农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiangjuexin
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以验证使用BBSV-sVP6重组病毒这一策略在提高目标蛋白(VP6)住转基因本生烟中的表达量的效果为目的,在本实验室前期工作的基础上,对转BBSV-sVP6本生烟中的目的基因的整合和转录以及蛋白质表达水平进行了分子检测。检测结果证实了目标基因在基因组水平上已经稳定整合,并启动了转录和翻译。同时采用ELISA的方法,比较了基因组中稳定整合了BBSV-sVP6基因的本生烟和基因组中稳定整合了VP6基因本生烟之间目标蛋白VP6的表达量差异,初步证实在转基因本生烟中BBSV-sVP6基因的表达量比VP6基因表达最提高了57%,提供了BBSV-sVP6策略可提高目标蛋白表达量的实验证据。 以获得转基因甜菜植株为目标,在本实验室前期工作的基础上,对甜菜不定根的发生条件进行了较系统的比较研究,获得了95株生根良好、移栽后存活的再生甜菜植株,经PCR检测,其中9株为阳生,完善了甜菜的遗传转化条件。 利用简并引物,通过RT-PCR克隆获得了TNV烟草分离物的全基因组序列,比对结果证实,该分离物属于TNV-A。
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