牛至和鱼腥草精油联合抑菌作用研究

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随着安全意识的不断提高,人们对于安全高效的天然抑菌物质的需求也越来越高。精油因其良好的抑菌活性及安全性受到越来越多的关注,它是一种具有广阔应用前景的天然抗菌物质。本研究采用水蒸气蒸馏法提取牛至精油(Origanum vulgare L.essential oil,OVEO)和鱼腥草精油(Houttuynia cordata T.essential oil,HCEO),以气质联用技术(GC-MS)鉴定两种精油主要成分;以五种常见病原菌微生物(金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯杆菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏杆菌和乙型副伤寒沙门氏杆菌)为试验菌,研究牛至和鱼腥草精油的抑菌活性,通过棋盘法确定两种精油的联合作用效果,并考察了牛至精油和鱼腥草精油联合抑菌的作用机理。主要研究结果如下:1.牛至精油中主要成分为百里香酚(24.73%),对伞花烃(23.56%)和4-异丙基苯甲酸(12.06%)等;鱼腥草精油中主要成为4-萜烯醇(15.65%),甲基正壬酮(13.38%)和1,1-二甲氧基癸烷(11.69%)等。2.牛至精油对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.625μL/m L,而其对肺炎克雷伯杆菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏杆菌和乙型副伤寒沙门氏杆菌的最小抑菌浓度均为1.25μL/m L,鱼腥草精油对五种试验菌的最小抑菌浓度均为5μL/m L。将牛至和鱼腥草精油联合使用时,牛至和鱼腥草精油分别以0.313μL/m L和0.313μL/m L复配时即可抑制金黄色葡萄球菌,为二者联合抑菌时的最小抑菌浓度(MIC联合)。而对其他四种试验菌,牛至精油和鱼腥草精油联合抑菌时的MIC联合为0.625μL/m L和0.313μL/m L,对五种细菌的分级抑菌指数均为0.563,表现为部分协同作用。3.通过扫描电镜观察到,牛至和鱼腥草复配精油联合作用后五种细菌细胞凹陷破裂,部分菌体完全破碎并粘聚成团,细胞形态遭到破坏。牛至和鱼腥草复配精油可导致五种细菌的细胞膜和细胞壁之间的碱性磷酸酶泄露,说明精油破坏了试验菌细胞壁;复配精油导致了细菌细胞内核酸类物质,活性蛋白和钾离子等内容物外泄,说明精油可导致细菌膜通透性和完整性发生改变;细菌的细胞膜电位及胞内琥珀酸脱氢酶活性随复配精油浓度增加而减小,表明牛至和鱼腥草复配精油可以显著抑制五种试验菌的呼吸作用。4.牛至精油和鱼腥草精油联合作用后细菌形成的细菌生物被膜面积明显减少,说明牛至精油和鱼腥草复配精油可抑制五种细菌生物被膜的形成。通过结晶紫染色试验也证实复配精油对细菌生物膜形成有抑制作用,并可以清除成熟生物膜。
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