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最近,一种新型膜相关雌激素受体:G蛋白偶联雌激素受体(G protein-coupled estrogen receptor 1,GPER;以前称之为GPR30)被鉴定。GPER在结构上不同于经典雌激素受体ERα、ERβ,膜定位特性又赋予其新的可介导雌激素快速非基因组效应的特性,从而引起研究者的广泛关注。作为7次跨膜GPCRs,GPER通过介导雌激素快速非基因组效应间接参与基因转录调控,影响下游效应分子在相应靶组织中发挥功能如影响细胞周期进程或增殖等。近来关于G-1激活GPER对细胞增殖影响的研究日渐增多,主要集中在肿瘤和生殖系统领域,且在不同癌细胞系中报道的作用机制也有差异,有待于更多更深入的研究来阐明所涉及的机制。故本文以乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231为材料,以E2及TSA处理为对照研究G-1激活GPER对乳腺癌细胞增殖的影响,获得的结果如下:运用E2和TSA处理为对照,通过细胞计数法绘制MCF-7和MDA-MB-231生长曲线的结果如下:E2处理同预期一样促进两种乳腺癌细胞株的生长;G-1和TSA单独处理均可显著抑制两细胞株的生长,并且G-1和TSA共同处理对细胞生长的抑制效应更显著。表明G-1具有和TSA类似的抑制乳腺癌细胞增殖的效应,且具有协同作用。运用E2处理为对照通过流式分析对G-1处理的乳腺癌细胞MCF-7的检测表明:同对照组相比,E2、G-1处理组S期和G2/M期细胞所占的比例均明显升高。尤其是10-5M的G-1处理24h和48h组,G2/M期细胞的比例分别高达38.7%和64.5%,结合生长曲线测定结果可知E2通过提高S期和G2/M期细胞所占的比例促进乳腺癌细胞的增殖;G-1激活GPER则通过将乳腺癌细胞阻滞在G2/M期而抑制其增殖。为进一步研究G-1处理抑制乳腺癌细胞增殖的分子机制,运用Western和免疫荧光技术对MCF-7和MDA-MB-231增殖和凋亡相关蛋白及pERK、pAKT、乙酰化组蛋白H3的水平进行了检测。结果显示细胞凋亡相关蛋白caspase6、P53的相对表达量显著增加,MCL-1的相对表达量显著降低;周期相关蛋白cyclin B1、P21的相对表达量显著增加,PCNA的相对表达量显著降低;pERK水平增加,pAKT水平降低。TSA作为已知的组蛋白去乙酰化酶抑制剂,可显著提高相关基因启动区组蛋白的乙酰化,参与周期和凋亡调控,我们发现G-1处理也可提高乳腺癌细胞内组蛋白乙酰化水平,进而以与TSA相似的方式抑制细胞的增殖,促进其凋亡。免疫荧光的结果也支持上述结论。通过划痕法检测G-1激活的GPER对两乳腺癌细胞迁移影响。结果表明:G-1激活GPER可显著抑制两细胞株的迁移。总之,本文结果表明:G-1激活的GPER可通过抑制AKT的磷酸化、持续激活ERK、调节细胞内凋亡和周期相关蛋白等的表达,诱导乳腺癌细胞凋亡和周期阻滞而抑制其增殖,并可显著抑制其迁移。而且G-1处理和TSA一样可引起乙酰化组蛋白H3水平的升高,并以TSA处理相似的方式影响细胞周期、凋亡和迁移相关蛋白的表达或激活进而促进其凋亡、抑制其增殖和迁移;这些结果支持G-1有可能和TSA一样,可作为新型的抗肿瘤药物,而GPER则可能是乳腺癌等的又一潜在治疗靶点。