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动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)是一种慢性炎症性疾病,血管壁的炎症是其发展过程中的主要表现之一。内皮细胞是贴衬于血管腔面的单层扁平上皮,其损伤及功能障碍不仅是AS的起始环节,同时在扩大血管炎症反应中也起了关键的作用。载脂蛋白E(apolipoprotein E,apoE)是血浆脂蛋白的结构蛋白,在血浆富含甘油三酯脂蛋白代谢中起重要作用。除通过参与脂质代谢影响AS发生、发展外,apoE的抗炎作用对于抑制AS发生发展也十分重要。载脂蛋白E受体2(apolipoprotein E receptor-2,ApoER2)是一个广泛存在于细胞膜上的跨膜内吞受体蛋白,其作为apoE的受体对apoE具有高度的亲和性。有研究表明,apoE与内皮细胞膜上的ApoER2结合刺激内皮一氧化氮合酶产生及内皮细胞迁移,同时也减弱单核细胞-内皮细胞粘附。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(proprotein convertase subtilisin kexin type 9,PCSK9)是近年来发现的一种新的蛋白水解酶,其通过调节肝细胞膜上的低密度脂蛋白受体(low density lipoprotein receptor,LDLR)的数量,影响血浆低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL-C)水平,从而间接参与AS的发生及进展。除降解LDLR外,PCSK9还可以降解LDLR家族的其他成员,如ApoER2、低密度脂蛋白受体相关蛋白1(low density lipoprotein receptor-related protein 1,LRP1)等。研究指出PCSK9与炎症相关联,炎症刺激PCSK9表达,同时,沉默PCSK9基因能减少炎性细胞因子的产生,但PCSK9与炎症间的具体机制仍待阐明。由于PCSK9能够降解ApoER2,那么PCSK9对ApoER2的降解与apoE/ApoER2抗炎作用之间是否存在联系,这将是本课题关注的重点。目的:PCSK9对ApoER2的降解与apoE/ApoER2抗炎作用间的联系。方法:Western blot检测LPS对TLR4、PCSK9、TNF-α、IL-6表达的影响;apoE3对LPS所致的HUVECs中PCSK9、ApoER2、TNF-α、IL-6表达的影响;PCSK9对ApoER2、TNF-α、IL-6表达的影响。并用ELISA分别检测各实验组上清PCSK9、TNF-α、IL-6水平。同时,Western blot检测apoE三种亚型(apoE2,apoE3,apoE4)对非炎状态下HUVECs、HepG2细胞PCSK9及ApoER2表达的影响。结果:明确LPS通过与HUVECs膜上的TLR4结合上调PCSK9、TNF-α、IL-6的表达。apoE3抑制LPS所致的HUVECs炎症状态并下调PCSK9的表达,上调ApoER2的表达,但apoE的三种亚型对非炎状态下HUVECs、HepG2细胞中PCSK9及ApoER2表达无影响。PCSK9下调ApoER2表达,并上调TNF-α、IL-6表达。结论:PCSK9通过降解ApoER2拮抗apoE/ApoER2的抗炎作用。