【摘 要】
：
背景:T细胞过度活化和克隆扩增是系统性红斑狼疮（SLE）发病进程中常见的免疫失衡现象,在自身免疫反应中扮演着重要角色。过度活化T细胞衰老可能是SLE发病进程中抑制免疫反应的一个重要机制。人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）移植治疗SLE取得较好疗效,但其对T细胞衰老的作用及机制尚不清楚。目的:本课题旨在研究hUC-MSCs在治疗SLE中对CD4+T细胞衰老的具体作用,深入探讨hUC-MSCs对C
论文部分内容阅读
背景:T细胞过度活化和克隆扩增是系统性红斑狼疮（SLE）发病进程中常见的免疫失衡现象,在自身免疫反应中扮演着重要角色。过度活化T细胞衰老可能是SLE发病进程中抑制免疫反应的一个重要机制。人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）移植治疗SLE取得较好疗效,但其对T细胞衰老的作用及机制尚不清楚。目的:本课题旨在研究hUC-MSCs在治疗SLE中对CD4+T细胞衰老的具体作用,深入探讨hUC-MSCs对CD4+T细胞衰老作用的分子机制,提供hUC-MSCs移植治疗SLE的新的理论依据。方法:将hUC-MSCs尾静脉注射至MRL/MpJ-Faslpr（MRL/lpr）狼疮小鼠,观察hUC-MSCs对狼疮鼠病情和T细胞衰老的作用和机制。磁珠分选脾脏CD4+T细胞,与hUC-MSCs以直接接触或transwell的方式共培养,进一步明确hUC-MSCs对T细胞衰老的作用和机制。利用Sirt1活化剂和抑制剂分别处理脾脏CD4+T细胞,并与hUC-MSCs体外共培养,探究Sirt1是否为hUC-MSCs增加CD4+T细胞衰老的介导分子。利用实时荧光定量聚合酶链反应（real time PCR）筛选针对Sirt1靶基因的micro RNAs（miRNAs）。设计双侧荧光素酶实验确证miRNA和Sirt1的直接作用。将CD4+T细胞和miR-199a-5p模拟剂（mimic）或抑制剂（inhibitor）共培养,观察miR-199a-5p对CD4+T细胞衰老作用及相关信号通路的影响。将CD4+T细胞和hUC-MSCs以Transwell方式共培养,加或不加RNase,明确hUC-MSCs是否为miR-199a-5p主要来源。最后分别将miR-199a-5p agomir及micrONTM agomir阴性对照试剂经尾静脉注射至MRL/lpr小鼠,观察其对病情的改善作用和对CD4+T细胞衰老的影响。结果:我们发现hUC-MSCs不仅可以缓解MRL/lpr狼疮小鼠病情,还可以通过抑制Sirt1/p53信号轴增加脾脏CD4+T细胞衰老。不管是直接接触还是Transwell体外实验,hUC-MSCs均可通过抑制Sirt1/p53信号增加脾脏CD4+T细胞衰老。进一步的信号通路研究确证Sirt1是hUC-MSCs增加CD4+T细胞衰老的介导分子。生物信息学预测的10个miRNAs中,只有miR-199a-5p水平在MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞明显降低,输注hUC-MSCs后明显升高。双侧荧光素酶实验结果提示miR-199a-5p和Sirt mRNA可直接作用。MiR-199a-5p mimic减少MRL/lpr小鼠CD4+T细胞Sirt1表达、增加细胞衰老;miR-199a-5p inhibitor增加野生型小鼠CD4+T细胞Sirt1表达、减少细胞衰老。与MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞比,hUC-MSCs中miR-199a-5p表达明显增加。hUC-MSCs与CD4+T细胞transwell共培养48h,可明显增加CD4+T细胞miR-199a-5p表达,减少Sirt1水平,增加细胞衰老。在hUC-MSCs与CD4+T细胞transwell共培养体系中加入RNase,可明显减少hUC-MSCs培养上清的miR-199a-5p水平,并显著抑制hUC-MSCs对CD4+T细胞衰老的作用。MiR-199a-5p agomir尾静脉注射MRL/lpr鼠4周,小鼠血清抗dsDNA抗体、IgG水平、肾脏病理损伤和IgG沉积均显著低于micrONTM agomir阴性对照组,而脾脏CD4+T细胞Sirt1水平明显降低、细胞衰老增加。结论:hUC-MSCs可通过miR-199a-5p/Sirt1/p53信号轴增加MRL/lpr小鼠脾脏CD4+T细胞衰老,发挥治疗作用。本研究不仅拓展了 hUC-MSCs移植治疗SLE免疫调节的理论依据,也提示miR-199a-5p可作为潜在疾病标志物或治疗靶点进一步研究。
其他文献
炎症性肠病（Inflammatory bowel diseases,IBD）是目前胃肠道最复杂的疾病之一,由于其致病机理的不确定性,导致该疾病尚无法完全治愈。IBD反复发作可引起结肠炎相关结肠癌的发生,严重威胁人类健康。IBD早年主要集中在西方发达国家,近年来,IBD在我国的发病率逐年升高。深入研究IBD发病机理,对于IBD临床诊疗和预后判断有十分重要的价值,也是我国生物医学领域研究人员亟待解决的
声学人工材料（包括声子晶体和声学超构材料）进一步拓展了自然界中声学材料的弹性波性质,能够实现奇异而有趣的物理效应,如负折射、超分辨成像、声学隐身等。本文通过构建声学人工材料中的几种狄拉克锥形色散关系和透射型超表面,实现了声波的多种异常调控操作。本论文在第一章绪论部分主要回顾了声学人工材料的分类、相关研究背景、最新进展以及声子晶体中狄拉克锥形色散关系,并概述了本论文的主要研究内容。在第二章中基于不同
随着我国海洋科技的逐步革新以及海洋强国战略的逐步推进,南海岛礁工程建设已得到飞速发展。在海洋工程建设过程中,钙质砂作为一种重要的地基材料得到十分广泛应用。由于钙质砂成因与一般陆源砂存在显著区别,因而其物理力学特征亦不同于一般陆源砂。在采用钙质砂作为建筑材料进行工程建设过程中,针对陆源砂所构建的常规工程建设理论和技术存在一定不足,因此,需进一步针对钙质砂物理力学特征进行深入探究,从而为形成针对钙质砂
中–上侏罗统的燕辽特异埋藏化石库产出了数量众多、保存精美的水生和陆生生物化石,包括多种植物、昆虫、鱼、蝾螈、蜥蜴、鳄型类、恐龙、翼龙以及哺乳形动物等。这些化石发现大多具有重要的演化意义,揭示了许多支系的演化早期类型或演化过程中的关键转折。尽管燕辽生物群的古生物学研究取得了一系列重要发现,这一化石宝库形成的古环境和化石特异埋藏机制迄今还缺乏系统的研究工作。同时,燕辽生物群目前不断有许多新化石材料产出
悬浮在大气中的细颗粒物(PM2.5)会影响能见度,改变地球辐射从而影响气候变化,还会对人类身体健康产生危害。PM2.5的性质与它的化学成分息息相关。不同区域PM2.5化学成分有较大的差异且来源复杂,研究中存在较多的不确定性。长三角城市群区是全球经济发展最快、人口最稠密的地区之一。该地区排放源及传输特征复杂,且相对湿度较高,气溶胶具有载荷高、理化性质季节差异大等特点。本研究以长三角西部地区南京大学地
哺乳动物的大脑皮层发育受到众多机制的调控,在其中信号通路蛋白的磷酸化与去磷酸化也扮演着重要的作用。关于调控蛋白质磷酸化的蛋白激酶,其在大脑皮层发育中的作用近来已经收获了广泛关注,很多蛋白激酶都被证实在大脑皮层发育中有着重要作用。而与此相对的,调控蛋白质去磷酸化的蛋白磷酸酶,其在大脑皮层中的作用则一直并不明确。其实,与蛋白激酶相比,蛋白磷酸酶底物更加广泛,其在细胞活动中的作用也更加多样,而很多细胞活
有机室温磷光（organic room temperature phosphorescence,RTP）与有机长余辉（organic long persistent luminescence,OLPL）材料在信息加密防伪、生物成像、白光照明、水氧传感、有机电致余辉器件和圆偏振发光方面有着非常广泛的应用。对有机磷光材料或者有机长余辉材料的研究重点在于提高磷光量子产率的同时提高磷光寿命。在过去的几十年
目的:（1）系统地分析缺血性脑卒中（IS）和短暂性脑缺血发作（TIA）患者特异血清microRNAs（miRNAs）的表达特征;探讨IS和TIA患者特异血清miRNAs的临床应用价值;（2）证实miR-23b-3p和miR-29b-3p与预测靶基因之间的靶向关系,探讨其在缺血性脑血管疾病中参与的分子调控网络和具体作用机制。方法:（1）通过混合血清样本Taq Man低密度芯片初筛以及单个血清样本的实
作为一种新型的超宽禁带半导体,β-Ga2O3具有超宽带隙（～4.9 e V）、高击穿电场以及良好的热稳定性和化学稳定性等优势,在光电材料和功率器件方面得到了广泛研究。其中,纳米结构的β-Ga2O3材料同时具有超宽禁带半导体材料的优势和纳米材料的特征,并且能够表现出薄膜结构所不具备的新的光学和电学性能,在气敏传感器、紫外探测器、微型光电子器件和柔性电子器件等领域具有潜在的应用前景。虽然目前关于β-G
疾病是机体在一定病因作用下自稳调节絮乱而发生的异常生命活动过程。从分子生物学角度来看,疾病通常是由于蛋白质质和量的改变导致的细胞功能絮乱,最终引起的人体某个或某些器官的异常工作。在分子生物学中,与疾病相关的生物表征、关联性问题等研究在疾病分析、诊断和疾病治疗等方面都发挥了重要作用。基于分子生物学实验的方法能够得到较为准确且置信度高的实验结果,但实验成本高、效率较低且无法验证所有可能的样本。而基于计