长角血蜱是我国南北方均广泛分布的优势蜱种之一,可传播巴贝斯虫、螺旋体、新发布里亚病毒等多种病原,在兽医和公共卫生学上具有重要意义。Micro RNA(miRN A)是在真核生物中发现的小的非编码RNA,可降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译,从而调节基因功能。本研究目的是对长角血蜱体内与吸血有关的miRNAs进行分子鉴定,以便为研制抗蜱新型药物或疫苗提供科学依据。本研究通过实时荧光定量PCR验证了长角血蜱吸血前后差异表达的10种miRN As分子。经miRN As干扰剂的注射,干扰了相应miRNAs的调节作用。通过动物实验对吸血相关的10种miRNAs进行筛选,成功筛选出对蜱吸血影响显著的3种miRNAs,即miR-278、Let-7和Bantam。采用PCR方法扩增3种miRNAs的前体序列;通过荧光定量PCR方法检测3种miRNAs在蜱的卵、幼蜱、若蜱和成蜱四个发育阶段以及成蜱的唾液腺、脂肪体、卵巢、中肠四种器官中的表达量;检测了miR-278在感染巴贝斯虫的蜱与未感染蜱中的差异表达;通过miR-278激动剂与抑制剂的注射检测了miR-278在蜱体内的生物学活性。结果显示在蜱体内获得了miR-278,Let-7和Bantam的前体序列;三种miRNAs均在若蜱和成蜱的脂肪体中表达量最高,但Bantam表达量在各个阶段均较miR-278和Let-7低;蜱吸入感染巴贝斯虫小鼠的血液后miR-278表达量显著降低;miR-278表达抑制后长角血蜱成蜱24 h上体率比未干扰成蜱下降至5%,死亡率高达72.5%,饱血率低至27.5%,产卵率、孵化率、饱血体重变化不明显。结果表明3种miRNAs的表达具有阶段和器官特异性,miR-278对长角血蜱成蜱的上体率和致死率影响显著,并且对感染巴贝斯虫蜱的吸血有一定的影响。在目前防控蜱与蜱传病方法比较单一的情况下,本研究从miRNA层面探讨了长角血蜱的吸血机制,可为抗蜱新型药物或疫苗的研发提供新的思路。