长白山区青楷槭抗弓形虫药效物质基础的研究报告

来源 :延边大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liujmjm
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:研究青楷槭中的化学成分并进行质量分析,探讨青楷槭化学成分的抗弓形虫作用。基于网络药理学的研究方法,探讨青楷槭治疗弓形虫病的作用机制,明确青楷槭化学成分通过多靶点、多途径产生抗弓形虫的多种信号通路。运用分子对接的方法,结合网络药理学,对分离出的青楷槭化合物与关键作用蛋白进行对接,筛选具有潜在抗弓形虫作用的天然化合物。方法:1.青楷槭干燥茎皮部分采用90%乙醇回流提取,提取物减压蒸馏得到乙醇提取物浸膏。采用溶剂梯度萃取法,利用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯依次进行萃取,减压蒸馏得到三种萃取物浸膏。采用多种色谱分离技术手段对得到的不同极性的石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯浸膏进行分离和纯化。通过单体化合物的核磁共振光谱(1H-NMR和13C-NMR)及其理化性质进行结构鉴定。2.对青楷槭中分离得到的化学成分红景天苷、酪醇,通过高效液相色谱法(HPLC)测定含量(Venusil ASB C18色谱柱:5μm,4.6×250 mm,流动相:15%甲醇-水,流速:1 m L·min-1,色谱柱中的温度:40℃)。3.通过四唑盐(MTT)比色法,检测青楷槭中分离得到的单体化合物的抗弓形虫作用,通过人胃上皮细胞(GES-1细胞)和感染刚地弓形虫后GES-1细胞的IC50值,计算出选择性指数(SI),评估青楷槭单体化合物的抗弓形虫作用。4.基于网络药理学对青楷槭活性成分与弓形虫靶点进行预测。利用分子对接对青楷槭活性成分与热休克蛋白70(TgHSP70)靶点进行结合,确定抗弓形虫病活性较好且对接效果较好的活性成分。结果:1.在该实验中,从青楷槭的乙酸乙酯提取层中获得了18种化合物,并通过光谱分析鉴定为酪醇(1),红景天苷(2),β-D-吡喃半乳糖苷(3),二氢松柏醇(4),(对羟基苯基)乙酸甲酯(5),4-羟基苯甲酸(6),没食子酸(7),没食子酸乙酯(8),4-羟基苯基乙酸(9),2-(4-羟基苯基)乙基3,4,5-三羟基苯甲酸酯(10),6-羟基-7-甲氧基香豆素(11),氟西汀(12),松香碱(13),东莨菪亭(14),(+)-没食子儿茶素(15),槲皮素(16),1,4-苯二甲酸(17),邻苯二甲酸二乙基己酯(18)。分离出的化合物有10个苯酚类化合物,4个香豆素类化合物,2个黄酮类化合物,2个苯甲酸脂类。化合物3、4、5、6、8、9、10、11、12、13、17、18是首次从该植物中分离出来的化合物。化合物3、4、5、17、18是首次从该科中分离出来的化合物。2.通过含量测定青楷槭乙醇提取物中红景天苷和酪醇的含量为3.1227 mg/g、1.0900 mg/g。青楷槭水提取物中红景天苷和酪醇的含量为2.14744 mg/g、0.5458mg/g。3.在体外实验(MTT)中,化合物6’-O-半乳糖苷,槲皮素,苦瓜甙A,二氢松柏醇,(-)-没食子儿茶素-3-O-没食子酸酯,6-羟基-7-甲氧基香豆素值比spi大,表明这些化合物在GES-1细胞中的细胞毒性较小。九种被测化合物的IC50(μM)均高于spi值,表明该化合物对弓形虫的毒性更大。其中,槲皮素,苦瓜甙A和6-羟基-7-甲氧基香豆素的SI优于spi,表明这些化合物可能比螺旋霉素具有更好的抗弓形虫活性。4.通过网络药理学和分子对接,筛选得到青楷槭19个活性成分,涉及446个作用靶点;分子对接显示主要活性成分与核心靶点具有较好的结合活性。富集到GO生物过程(biological process)1504条、分子功能(molecular function)58条、细胞组分(cellular component)31条;KEGG通路124条,包括TNF、IL-6等信号通路。通过将青楷槭分离得到的18种化合物与目标蛋白TgHSP70进行分子对接,筛选出具有更好活性的化合物。其中,更好的活性和更好的对接效果的结果是(+)-gallocatechin(-5.778)>asculetine(-5.682)>salidroside(-5.562)>2-(4-hydroxyphenyl)ethyl 3,4,5-trihydroxybenzoate(-5.392)>gallic acid(-5.310)。评价了通过分子对接方法获得的5种单体化合物(+)-没食子儿茶素,松香碱,红景天苷,2-(4-羟基苯基)乙基3,4,5-三羟基苯甲酸酯和没食子酸的抗弓形虫活性,并评估了评价该单体与TgHSP70蛋白结合的能力。结论:本研究从青楷槭的乙醇粗提物的乙酸乙酯层分离得到18个单体化合物,为进一步研究青楷槭作用机理及开发利用该药用植物资源提供了基础。通过体外实验证明了青楷槭提取物具有抗弓形虫活性。用网络药理学和分子对接方法探讨青楷槭治疗弓形虫病的作用机制,本研究初步揭示了青楷槭可能通过多个成分,多个靶点,多条信号通路协同发挥治疗弓形虫的保护作用,为其深入研究提供了基础。本研究增加了我们对青楷槭化学成分的了解,为青楷槭的开发与应用提供了可靠的理论依据。
其他文献
目的:对临床药师参与某院呼吸内科碳青霉烯类抗菌药物的应用管理前后效果进行比较研究。通过查阅并分析病历找出问题,开展临床药学服务,参与治疗方案制定、医嘱审核、药学查房、病例讨论、药物不良反应监测、药物疗效评估、患者预后情况调查等方式提高该院呼吸内科碳青霉烯类药物的使用合理性、减少耐药菌群的产生。方法:选取2019年1月至2020年6月该院呼吸内科收治的使用碳青霉烯类抗菌药物的144例病历,其中临床药
当今,恶性肿瘤是危害人类健康的主要疾病之一。而骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)是一种血液系统性恶性肿瘤疾病,其具有高度的异质性。通过一系列临床试验可知,去甲基化药物(hypomethylating agents,HMA)阿扎胞苷冻干粉针剂现已成为治疗MDS的一线药物。国外多项研究已证明该药能延长高风险MDS病人的生存期和延迟白血病的转化。但国内该药于2
目的:为了观察晚期乳腺癌患者使用3种国产注射用紫杉醇(白蛋白结合型)的不良反应、同时探讨其周围神经毒性发生率和严重程度,筛选出神经毒性相关危险因素,为神经毒性的预防及治疗提供参考。方法:收集青岛市某三甲医院乳腺诊疗中心2018年1月至2020年12月期间接受含注射用紫杉醇(白蛋白结合型)化疗方案,确诊为晚期乳腺癌共90例,对患者临床资料进行回顾性分析。收集患者的基本信息及临床资料,整理患者不良反应
随着社会的飞速发展,电子通信技术和传播媒介的不断演变,人类的信息传播技术早已进入了“视觉化”、“图像化”甚至“影像化”。因此,人们在吸收大量的视觉文化同时,对其体验的质量要求也越来越高了。作为视觉艺术门类中的摄影艺术,从诞生到至今一百多年的时间里,也迅速地引起了一波浪潮,在当今社会中广泛普及。摄影具有记录的特性和传播的意义。通过照片我们可以了解到画面中所发生的“故事”以及拍摄者的情感思想。视觉思维
党的十八大以来,习近平总书记多次围绕“学校培养什么样的人、为谁培养人、怎样培养人”发表重要论述,在2018年9月10日的全国教育大会上,习近平总书记将教育目标从“培养德智体美全面发展的社会主义建设者和接班人”拓展为“培养德智体美劳全面发展的社会主义建设者和接班人”,将“劳”写入教育目标,这代表着党和国家高度重视劳动教育,加强劳动教育是全阶段教育系统面对的共同课题。2020年7月,为加快构建全面培养
阿尔兹海默症(Alzheimer’s disease,AD)是中枢神经组织退行性变性从而产生的一种慢性且不可逆的疾病,且多发病于中老年人。然而目前为止病理学机制尚不完全明确。在我国随着人口老龄化的不断加剧,使得阿尔兹海默症成了最难治愈的疾病之一。至今为止,没有任何一种药物可以逆转阿尔兹海默症的发病或者停止神经系统的损伤。因此,研究与开发毒性小、神经保护作用强的治疗阿尔兹海默症的药物,有十分重要的意
本次口译实践报告所选取的语料是斯坦福课程“数据科学及AI技术对新冠病毒研究与建模”,课程主要内容包括新冠病毒内部结构、病毒传播过程、公共卫生政策、疫情社会调查、流行病学建模以及药物研发。本文内容包括口译任务介绍、译前准备、口译过程、口译实践中的问题与应对策略以及口译实践总结。交替传译过程的音频、转写文本以及笔记体现错误集中于专业知识、长句传译以及译语输出三方面。在具体的案例分析中,直译、意译、意群
在我国,中小企业的数量在企业类型中占比超过一半,对拉动我国GDP增长、解决剩余劳动力促进就业、提高我国城镇居民收入水平等方面发挥重要作用,在一定程度上推动我国社会的发展与进步。由于中小企业的重要作用和地位,对中小企业的研究迫在眉睫。对于企业而言,税收影响着企业的利润,国外很早就已经开始通过税务筹划的手段进行节税,以保证企业利润最大化。而我国中小企业的税务筹划工作发展较晚,目前处于发展阶段,大多数企
英语短语动词是动词加上一个或者两个小品词的惯用组合,在英语表达中具有较高的使用频率。由于短语动词的多义性不易掌握,一直以来是英语学习的重难点之一。认知语言学家们认为探寻短语动词的理据应从黏附动词的小品词着手。本文以带over的短语动词为研究对象,分析短语动词的语义多样化。本文基于Taylor(1989)和Lakoff(1987)对小品词over的语义分析成果,运用认知语言学领域的意象图式理论和概念
目的:观察右美托咪定复合局麻药用于臂丛神经阻滞复合全身麻醉在关节镜下肩袖修补术中的应用效果。方法:于2020年8月-2021年3月期间,选取60例美国麻醉医师协会分级(ASA)I-II级,在延边医院行关节镜下肩袖修补术的患者,按照随机数字表法分成三组,每组20例。A组行超声引导下臂丛神经阻滞(0.5μg/kg右美托咪定+0.5%罗哌卡因共15ml)复合全身麻醉(n=20),B组行超声引导下臂丛神经