植物生长素的标记及测定方法研究

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本论文共分三章,包括绪论:双浊点萃取、叔胺标记与毛细管电泳-电化学发光用于植物生长素的提取、分离和检测;基于埃里希反应的吲哚乙酸和吲哚丁酸快速比色检测法。   第一章为绪论部分。对植物生长素的特点、传统研究方法、萃取方法尤其是双浊点萃取、标记方法进行了详细的综述;同时详细讨论了毛细管电泳基础理论知识、类型、检测方法、应用前景以及Ru(bpy)32+电化学发光基础知识,最后讨论了毛细管电泳-电化学发光联用的相关知识。   第二章是双浊点萃取、叔胺标记与毛细管电泳-电化学发光用于植物生长素的提取、分离和检测。本文发展了一种高选择性提取和高灵敏度检测吲哚乙酸和吲哚丁酸的方法。利用双浊点萃取技术经济、安全、高效、操作简便、选择性高,实现对植物中的生长素的高效提取;之后用叔胺物质-AEMP对植物生长素进行标记使其生成具有电化学发光活性的衍生物,用毛细管电泳-Ru(bpy)32+电化学发光分离检测衍生物,实现对生长素吲哚乙酸和吲哚丁酸含量的测定。对测定吲哚乙酸和吲哚丁酸的检测限分别是2.5 nM和2.8 nM。该检测方法能有效去除基质干扰、灵敏度高、操作简单,并成功地用于洋槐嫩叶、嫩芽和豆芽中生长素的分离和检测。   第三章是基于埃里希反应的吲哚乙酸和吲哚丁酸快速比色检测法。本章采用埃里希反应来定量检测植物生长素吲哚乙酸和吲哚丁酸。对二甲氨基苯甲醛(PDAB),称为埃里希试剂,在合适的条件下它可以使吲哚类化合物显色,并在很宽的浓度线性范围内服从朗伯比尔定律。这种显色反应可以降低实验成本并简化实验过程,仅采用裸眼无需复杂的仪器便可实现检测。首先,让吲哚乙酸、吲哚丁酸或它们的混合物在酸性条件下与埃里希试剂反应,根据它们对温度和时间的不同响应,在25℃时反应40 min实现了在吲哚乙酸存在时选择性检测吲哚丁酸。而在70℃时两者都发生反应,150 min后可以测定二者衍生物总的吸光度,根据总量和吲哚丁酸吸光度的差值计算吲哚乙酸的含量。讨论了反应中溶剂的组分、反应时间、温度及PDAB的浓度对反应的影响。该方法成功检测了不同生长阶段的豆芽中生长素含量的变化。
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