论文部分内容阅读
目的：建立星形胶质细胞（Astrocyte AS）缺氧／复氧损伤模型，观察骨髓间充质干细胞（Bone Marrow stromal cells BMSCs）对缺氧／复氧后AS凋亡和TrkB/Bcl-2蛋白表达变化的影响。探讨BMSCs治疗脑缺血损伤的可能机制。
方法：提取SD大鼠的BMSCs和新生SD大鼠的AS原代培养，并传代、扩增、鉴定。采用三气培养箱，将AS缺氧8h后再恢复正常培养条件建立AS缺氧／复氧损伤模型。采用Transwell共培养板将缺氧8h后的AS与BMSCs共培养12h、24h、36h、48h、60h。实验分为正常对照组(N组)、缺氧／复氧组(H/R组)、共培养组（C组）。观察BMSCs对缺氧／复氧后AS凋亡和TrkB/Bc1-2蛋白表达变化的影响。采用Annexin V-FTTC检测AS细胞的凋亡，Western blot检测TrkB/Bcl-2蛋白表达，SPSS13.0统计软件进行数据分析。
结果：1．成功分离、纯化、扩增、鉴定大鼠BMSCs、新生大鼠AS，均达到实验要求的纯度。2．建立星形胶质细胞缺氧／复氧损伤模型，并应用Transwell共培板将其与BMSCs成功共培养。3．共培养24h后共培养组AS的凋亡率明显低于缺氧／复氧组(P＜0.05)。4．缺氧8h后，缺氧／复氧(H/R)组、共培养(C)组TrkB表达增多，蛋白24h表达升高达峰值，此后虽有所降低但仍维持较高水平，组间两两比较，对照组低于缺氧／复氧(H/R)组(P＜0.05)，缺氧／复氧(H/R)组低于共培养组(P＜0.05):Bcl-2蛋白表达亦明显上调，高峰出现于24h，组间两两比较，对照组低于缺氧／复氧（H/R）组（P＜0.05），缺氧／复氧（H/R）组低于共培养组(P＜0.05)。
结论：1．缺氧／复氧后的AS细胞损害随着时间延长逐渐加重。2．缺氧／复氧后的AS细胞TrkB/Bcl-2通路活性增强。3.BMSCs可能通过调控缺氧／复氧损伤AS细胞TrkB/Bcl-2通路活性来抑制AS凋亡，从而减轻缺氧／复氧后的AS细胞的损害。