在现有的医学科学技术条件下，对于终末期肾衰竭病人，肾移植是最佳的治疗手段。在过去的二十年中，尽管移植肾的短期存活率有了显著提高，但移植肾的长期存活率仍无明显改善。慢性移植性肾病(CAN)，或慢性排斥是临床上导致移植肾长期肾失功的最重要原因之一。它是在肾移植中和肾移植后多种抗原依赖的和非抗原依赖的因素引起，多种细胞长期共同作用导致移植物受损的过程。慢性移植性肾病的临床表现为蛋白尿的出现，血压升高以及进行性的肾功能减退，组织学特点包括肾小管萎缩，间质纤维化以及内膜增生的血管病变和移植性肾小球病变。 来氟米特和它的活性代谢物A77 1726为一类新的免疫抑制剂，它的主要作用为抑制嘧啶的再合成和抑制蛋白酪氨酸激酶的活性，从而抑制T细胞和B细胞的功能。在多个同种移植和异种移植模型中已显示它能延长包括皮肤，心脏，肾脏和肝脏的移植物存活时间。初步的观察表明该药也能被病人很好的接受，在自身免疫性疾病的使用中己取得了令人鼓舞的效果。但由于A77 1726的半衰期长(15-18天)，从而导致来氟米特在移植病人的使用带来困难。FK778为来氟米特的活性成份A77 1726衍生物，和A77 1726比较，半衰期缩短(6-45小时)，从而为其在肾移植病人中的使用带来了可能，并且体内和体外的实验表明，和来氟米特比较，FK778有一个相似的甚至更高的免疫抑制活性。 在本研究中，我们主要探讨在大鼠慢排模型的不同阶段给予低剂量FK778对大鼠慢性移植性肾病长期预后的影响，以全面了解FK778在慢排中的治疗效果及相关机理。本实验包括三部分： 1．小剂量FK778持续治疗对大鼠慢性移植性肾病长期预后的影响。 2．肾移植后早期短期使用小剂量FK778对大鼠慢性移植性。肾病长期预后的影响。 3．肾移植后延迟使用小剂量FK778对大鼠慢性移植性肾病长期预后的影响。 第一部分 小剂量FK778持续治疗对大鼠慢性移植性 肾病长期预后的影响 材料与方法 采用国际上通用的慢排模型的的制作方法，Fisher(F344)大鼠为供体，Lewis(LEW)大鼠为受体，行大鼠左肾原位移植，肾移植后切除受体右肾。从肾移植的第一天开始至第24周末每天使用FK778灌胃治疗，剂量为5mg／kg／天。每四周测定大鼠24小时尿蛋白含量。第24周末收获大鼠，分别行移植肾组织形态学检查，免疫组化分析及TGF-β和PDGF-B mRNA表达分析。 结果 从第12周开始，和相同时间点的对照组比较，治疗组大鼠24小时尿蛋白定量显著减少，直到第24周。根椐Banff97评分标准对移植肾评分后发现，接受持续治疗的移植鼠和其对照组比较，评分显著降低，同时持续治疗组肾小球硬化程度也显著降低。第24周时在所有大鼠移植肾均可发现CD5阳性的T淋巴细胞和CD68阳性的单核／巨噬细胞浸润，T淋巴细胞在持续治疗组和对照组比较，治疗组浸润细胞数显著降低，同样单核／巨噬细胞在持续治疗组和对照组比较，治疗组浸润细胞数也显著降低。使用实时定量RT-PCR，我们检测了第24周末TGF-β和FDGF-B mRNA在移植肾的表达,TGF-β mRNA的表达在治疗组和对照组比较，虽然治疗组较低，但两组无显著差异；FDGF-B mRNA的表达在治疗组和对照组比较出现显著差异。 结论 小剂量FK778持续治疗能显著改善大鼠慢性移植性肾病的长期预后。 第二部分肾移植后早期短期使用小剂量FK778对大鼠慢性移植性肾病长期预后的影响 材料与方法 采用国际上通用的慢排模型的的制作方法，Fisher(F344)大鼠为供体，Lewis(LEW)大鼠为受体，行大鼠左肾原位移植，肾移植后切除受体右肾。治疗组从肾移植后第一天开始至第十天，每天使用FK778灌胃治疗，剂量为5mg/kg/天。治疗十天后继续观察直至第24周末。每四周测定大鼠24小时尿蛋白含量。第24周末收获大鼠，并分别行移植肾组织形态学检查，免疫组化分析及TGF-B和PDGF-B mRNA表达的分析。 结果 随着观察时间的延长，治疗组24小时尿蛋白定量和同一时间点的对照组比较，无显著差异，直至第24周。根椐Banff97评分标准对移植肾评分后发现，接受早期短期治疗的移植鼠和其对照组比较，评分无明显差异，同样肾小球硬化程度在两组之间也无显著差异。在第24周时在所有大鼠移植肾组织均可发现CD5阳性的T淋巴细胞和CD68阳性的单核/巨噬细胞浸润。T淋巴细胞浸润数在治疗组和对照组比较无显著差别，单核/巨噬细胞在治疗组和对照组比较也无明显差别。使用实时定量RT-PCR，我们检测了第24周末治疗组和对照组移植肾组织TGF-β和FDGF-B mRNA的表达，治疗组和对照组比较，两个生长因子的mRNA表达均无显著差异。 结论 小剂量FK778在肾移植后早期短期治疗不能有效改善大鼠慢性移植性肾病的长期预后。 第三部分肾移植后延迟使用小剂量FK778对大鼠 慢性移植性肾病长期预后的影响 材料与方法 采用国际上通用的慢排模型的的制作方法，Fisher(F344)大鼠为供体，Lewis(LEW)大鼠为受体，行大鼠左肾原位移植，肾移植后切除受体右肾。从肾移植后第16周开始至第24周末每天使用FK778灌胃治疗，剂量为5mg/kg天。每四周测大鼠24小时尿蛋白含量。第24周末收获大鼠，并分别行移植肾组织形态学检查，免疫组化分析及TGF-β和PDGF-BmRNA表达的分析。 结果 治疗组大鼠第16周开始使用FK778治疗后，经过一段时间，和相同时间点的对照组比较，24小时尿蛋白定量开始下降，到第24周时显著减少。根椐Banff 97评分标准对移植肾评分后发现，接受延迟治疗的移植鼠和其对照组比较，评分显著降低，同时延迟治疗组肾小球硬化程度也显著降低。在第24周时在所有大鼠移植。肾均可发现CD5阳性的T淋巴细胞和CD68阳性的单核／巨噬细胞浸润，T淋巴细胞在接受FK778延迟治疗组和对照组比较，治疗组浸润细胞数显著降低，同样单核／巨噬细胞在接受FK778延迟治疗组和对照组比较，治疗组浸润细胞数也显著降低。使用实时定量RT-PCR，我们检测了第24周末TGF-β和FDGF-B mRNA在移植肾的表达，TGF-β的表达在治疗组和对照组比较出现显著差异；FDGF-B的表达在治疗组和对照组比较，虽然治疗组较低，但两组比较无显著差异。 结论 小剂量FK778延迟治能显著改善大鼠慢性移植性肾病的长期预后。