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目的:对VEGF-C, VEGF-D及其受体VEGFR-3在良性疾病和NSCLC肺癌组织及淋巴结组织中的表达进行研究,探寻他们相互之间的关系,从而进一步探讨VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3在NSCLC淋巴管生成和淋巴结早期转移中的作用,为完善肺癌的分子分期,寻找新的治疗靶点提供科学依据,并在此基础上选择合理的治疗方案。方法:本课题采用半定量RT-PCR及免疫组化的方法对NSCLC肺癌组织中及淋巴结组织中的VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 mRNA及蛋白的表达进行检测并与良性疾病对照组进行对比,研究其与淋巴结转移的关系。选取手术切除的良性疾病及肺癌患者肺组织和淋巴结组织作为研究对象。其中良性疾病肺组织10例,相应的淋巴结8枚。肺癌组织52例,相应的淋巴结196枚,以术后病理为标准,至少有一枚淋巴结转移者划为淋巴结转移阳性组,无淋巴结转移者划为淋巴结转移阴性组。摘除的196枚淋巴结中,淋巴结转移阳性组占98枚,其中72枚病理阳性,26枚病理阴性;淋巴结转移阴性组中淋巴结占98枚。全部病例于手术中肺癌组织及淋巴结组织离体后立即取材,放于液氮中保存。液氮研磨,Trizol法抽提总RNA,逆转录聚合酶链反应技术(RT-PCR)检测VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3基因的表达,quantity one软件对RT-PCR产物条带进行定量分析。从52例患者中选取30例患者的肺及淋巴结组织石蜡标本,采用免疫组化法,对VEGF-C、VEGFR-3蛋白的表达进行检测。结果:实验结果表明VEGF-C mRNA、VEGF-D mRNA、VEGFR-3 mRNA的表达与淋巴结转移有关。1)VEGF-C mRNA的表达水平在淋巴结转移阳性组的肺癌组织中较淋巴结转移阴性组的肺癌组织中增高(P<0.001),2)VEGF-C mRNA在淋巴结转移阳性组的阳性淋巴结组织中的表达水平显著高于淋巴结转移阴性组的阴性淋巴结中的表达水平(P<0.001)。3)VEGF-D mRNA、VEGFR-3 mRNA在淋巴结转移阳性组的阳性淋巴结组织中的表达水平却较淋巴结转移阴性组中阴性淋巴结中的表达水平降低(P<0.05)。4)在淋巴结转移阳性组中,VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 mRNA在阳性淋巴结与阴性淋巴结中的表达水平无显著区别(P>0.05)。5)VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达三者之间显著相关(P<0.05)。6)免疫组化显示VEGF-C蛋白的表达主要位于肿瘤细胞胞浆,在间质的巨噬细胞也有表达, VEGF-C蛋白阳性率与淋巴结转移有关。VEGF-C蛋白的表达与VEGF-C mRNA的表达亦相关。VEGFR-3不仅在淋巴管内皮细胞表达,在小血管内皮及肿瘤细胞胞浆也有表达。VEGFR-3阳性管计数在癌旁组织显著高于癌组织。结论:VEGF-C、VEGF-D、VEGFR-3 mRNA的表达水平与肺癌淋巴结转移有显著的相关性,在预测肺癌的淋巴结转移,完善分子分期,指导临床治疗上有重要意义,有希望成为新的分子诊断标志,在今后的实际应用中有广阔的前景。