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沼肥是农业科技发展,大力推广农村沼气工程的附产物,是生物有机肥的一种,富含多种养分。施用沼肥会对土壤微生物群落结构造成影响,其中微生物多样性的改善和促进作用对土壤生态环境来说是有利的。本文通过在成都崇州进行野外田间试验,设计了6个处理：不施肥对照(CK)、单施化肥(NPK)、沼肥和化肥混施(NG)、沼肥低量(G1)、沼肥中量(G2)和沼肥高量(G3)。测定了5种土壤酶活性,土壤微生物量碳(Soil Microbial Biomass Carbon、土壤微生物量氮(Soil Microbial Biomass Nitro gen、可培养微生物数量,并对可培养细菌的进行分离纯化后,研究了不同处理土壤可培养细菌的遗传多样性。取得了以下研究结果：1.不同处理土壤磷酸酶和几丁质酶活性随小麦生育期而显著变化,拔节期最高,收获期最低。不同处理间土壤酶活性差异明显,收获期G3处理磷酸酶活性最高,为1003.29±80.03 μmol h-1 g-1;几丁质酶活性最高的是拔节期NPK处理,为38.87±3.46 μmol h-1 g-1;土壤过氧化氢酶和多酚氧化酶活性随沼肥施用量增加(G1、G2、G3处理)而增加,G3处理过氧化氢酶活性在拔节期和收获期较高,分别为12.62±0.21 μmol h-1 g-1和15.45±0.26 μmol h-1 g-1。小麦不同生育期,土壤淀粉酶活性最高的是NG处理,其中收获期NG处理达230.58±10.82 μgh-1 g-1。2.不同处理SMBC和随小麦生育期而变化,以拔节期最高,苗期最低,其中,G2处理拔节期SMBC最高,为1551.09±35.42μg g-1,收获期最低,为1023.27±65.33μg g-1。不同处理SMBN随小麦生育期而增长,收获期最高,苗期最低。其中,收获期G3处理最高,SMBN为73.74±7.96μg g-1。3. 土壤可培养细菌数量最低值出现在苗期,为16.98×106 cfu g-1,最大值出现在收获期,为49.80×106 cfu g-1。G1、G2、G3和NG处理可培养细菌数量显著高于NPK和CK处理。不同处理土壤可培养真菌数量存在差异,沼肥施用处理(G1、G2、G3和NG)以拔节期最高,苗期最低；NPK和CK处理则以苗期最高,收获期最低。在苗期,土壤真菌数量最高的是NPK处理,为36.75±1.61×104 cfu g-1;在拔节期和收获期土壤真菌数量最高的是G1,分别为56.91±2.67×104 cfu g-1和51.40±1.28×104 cfu g-1。在苗期和拔节期,土壤放线菌数量最高的是NG处理,分别为213.11±34.17×105 cfu g-1和76.77±4.74×105 cfu g-1;在收获期,放线菌数量最高的是G3处理,为165.47±22.39×105 cfu g-1。4.采用稀释分离获得了184株可培养细菌,应用BOXAIR-PCR和16S rDNA RFLP研究了菌株的遗传多样性,结果表明,土壤细菌间遗传多样性明显存在。代表菌株16S rDNA序列系统发育分析表明,供试菌株形成了4个分支,芽孢杆菌属(Bacillus)数量为主,但种类差异较大。赖氨酸芽孢杆菌属(Lysinibacillus)出现在小麦苗期和拔节期施肥土壤；微杆菌属(Mircobacterium)仅出现在小麦拔节期土壤；短小芽孢杆菌(B.pumilus)出现在小麦收获期土壤。