【摘 要】
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弧菌是海洋中最常见的一种细菌群体,是许多海产养殖生物的致病菌。弧菌病带来的主要问题是影响海洋水产养殖和造成严重经济损失。目前,使用抗生素是控制细菌疾病的主要治疗方
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弧菌是海洋中最常见的一种细菌群体,是许多海产养殖生物的致病菌。弧菌病带来的主要问题是影响海洋水产养殖和造成严重经济损失。目前,使用抗生素是控制细菌疾病的主要治疗方法。然而,频繁使用抗生素会导致耐药病原体的出现以及水产品抗生素残留问题,对公众健康构成巨大威胁。因此,开发新的替代策略控制病原菌亟待研究。 噬菌体治疗有高度特异性、自我复制性、对环境影响较少等优势,因此被认为在海产养殖中能够替代抗生素。本研究旨在分离特定的海水养殖病原弧菌裂解性噬菌体,研究其与宿主之间的关系,并探讨使用噬菌体鸡尾酒疗法来控制水产养殖中弧菌病原菌的潜能。 本研究从厦门的鲍鱼养殖场水体中总共分离得到38株弧菌菌株和43株裂解性噬菌体,并对其中五株欧文氏弧菌噬菌体的一步生长曲线、感染复数(MOI)、限制性酶切分析以及热稳定性和酸碱稳定性等生物学特性进行了初步研究。结果表明,这五株噬菌体都属于长尾科(Siphoviridae),有较快的增长率、较高的热稳定性和较强的pH耐受能力;但其裂解能力和限制性酶切片段不一样;同时,它们都有荧光标记噬菌体快速检测弧菌的应用潜力。 此外,为了探讨噬菌体鸡尾酒疗法控制水产养殖弧菌病原菌的可行性,对两株坎贝氏弧菌烈性噬菌体的生物防治能力进行了初步研究。鲍鱼感染弧菌的研究表明,这两株噬菌体能够将染菌鲍鱼的存活率由12.5%提高到75%。因此可以推断,噬菌体治疗将是一个有效的代替抗生素来控制鲍鱼病害的方法。 最后,本研究还发现了少见的巨噬菌体V7D,并完成了它的全基因组测序。V7D的基因组是线性双链结构,共246964bp,GC含量为41.31%,共有378个ORF、27个tRNA,是已完成测序的弧菌噬菌体的基因组中最大的。V7D中参与叶酸代谢的四个基因与其它两株巨噬菌体KVP40和phi-pp2有很近的亲缘性。
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