一、目的：1、研究肿瘤干细胞在视网膜母细胞瘤化疗耐药中的作用；2、开发更有效的新型化疗药物并探索更科学的化疗方案二、方法：选用Y79细胞株及本课题组前期工作中自行建立的、具有肿瘤干细胞样特性的细胞株FD-RB作为研究的对象。用CCK-8的方法检测新型化疗药物拓扑替康、DG-2在不同浓度下对Y79细胞和FD-RB细胞的抑制作用,并与Rb传统化疗药物卡铂及长春新碱的体外作用做对照,用t检验的方法比较两株细胞在各种药物不同浓度下的存活率差异,同时比较新型化疗药物与传统化疗药物的半数抑制浓度(IC50),筛选出体外杀伤作用最强的化疗药物；将不同浓度的DG-2与拓扑替康、卡铂进行两两组合,检测联合用药下Y79和FD-RB的细胞存活率,用多重线性回归分析联合用药与单药使用的效用差异,并分析药物间的相互作用。三、结果FD-RB细胞的体外耐药性低于Y79细胞,两者的差异具有统计学意义(P<0.05)；在四种检测药物中,拓扑替康的体外细胞杀伤作用仅次于长春新碱,它对Y79细胞的IC50约为6.52umol/L,对FD-RB细胞的IC50约为0.026umol/L; DG-2在有氧状态下也能有效杀伤两株细胞；拓扑替康与DG-2联合应用时可能会相互削弱的彼此的效用；卡铂和DG-2的体外联合用药未发现交互作用,两者的联合效应只是两者单独效应的叠加。四、结论从本研究的数据来看,肿瘤干细胞不一定是导致肿瘤耐药、化疗失败的唯一因素,其自身的耐药性也受多方面的影响。拓扑替康在体外对Y79及FD-RB细胞均有良好的杀伤作用,对于治疗复发转移的Rb具有潜在的临床应用价值；DG-2在正常氧供状态下也可抑制Y79及FD-RB细胞的生长,结合其降低缺氧相关的化疗耐药作用,DG-2在Rb中的治疗前景令人期待。拓扑替康与DG-2联合应用体内疗效有待进一步实验证实。