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背景增生性瘢痕（hypertrophic scar,HS）是一种由皮肤损伤后伤口异常愈合引起的纤维增生性疾病,其特征是细胞外基质过度沉积和成纤维细胞的侵袭性生长。最近的研究表明,一些非编码RNA（non-coding RNA,ncRNA）如长链非编码RNA（long noncoding RNA,lncRNA）、微小RNA（microRNA,miRNA）等涉及HS的形成,但其机制仍不清楚。第10号染色体丢失的张力蛋白同源的磷酸酶基因（phosphates and tensing homologue deleted on chromosome 10,PTEN）是一种肿瘤抑制因子,同时PTEN也参与HS的形成和发展。有文献报道lncRNA TRHDE-AS1在HS组织和增生性瘢痕成纤维细胞（Hypertrophic scar fibroblast,HSF）中被下调,其可能与瘢痕的形成有关。为了探索lncRNA TRHDE-AS1在HS形成中的作用和机制,进行了本课题的研究。目的1.明确lncRNA TRHDE-AS1在HS形成中的作用。2.证实HS形成中存在lncRNA TRHDE-AS1/miR-181a-5p/PTEN调控通路。方法1.收集30例HS患者的瘢痕组织及邻近正常皮肤（Normal Skin,NS）组织,qRT-PCR法检测lncRNA TRHDE-AS1的表达。2.调控lncRNA TRHDE-AS1表达对HSF增殖、凋亡的影响:用pc DNA3.1、pc DNA3.1-TRHDE-AS1、NC si RNA和TRHDE-AS1 si RNA转染HSF,CCK-8方法、流式细胞术检测对细胞的增殖、凋亡的影响。3.研究lncRNA TRHDE-AS1与miR-181a-5p的关系及对HSF增殖、凋亡的影响:使用Lnc Base（http://carolina.imis.athena-innovation.gr/dianatools）预测lncRNA TRHDE-AS1与miR-181a-5p的结合靶位,通过qRT-PCR检测调控lncRNA TRHDE-AS1表达细胞的miR-181a-5p表达水平。双荧光素酶报告基因实验确认lncRNA TRHDE-AS1与miR-181a-5p的作用关系。用miR-181a-5p mimic逆转过表达lncRNA TRHDE-AS1对细胞增殖、凋亡的作用。4.miR-181a-5p靶基因PTEN的确立:使用Target Scan（http://www.targetscan.org）预测miR-181a-5p与PTEN 3’-UTR的结合位点。构建PTEN 3’-UTR野生型和突变型报告基因载体,双荧光素酶报告实验测定miR-181a-5p和PTEN之间的相互作用。Western blot法检测调控miR-181a-5p对PTEN蛋白表达的影响。用miR-181a-5p mimic逆转过表达lncRNA TRHDE-AS1对PTEN蛋白表达的作用。5.验证lncRNA TRHDE-AS1和miR-181a-5p在调控HSF增殖和凋亡的通路中是否经过PTEN:用CCK-8和流式细胞术的方法检测抑制PTEN逆转lncRNA TRHDE-AS1过表达、miR-181a-5p敲低对细胞增殖、凋亡的作用。结果1.30例HS与相应的正常组织相比,qRT-PCR结果显示LncRNA TRHDE-AS1在增生性瘢痕组织中显著下调,差异具有统计学意义（P<0.05）。2.CCK-8结果显示:过表达lncRNA TRHDE-AS1对HSF增殖显著抑制（P<0.05）,沉默lncRNA TRHDE-AS1对HSF增殖显著促进（P<0.05）。流式细胞术结果显示过表达lncRNA TRHDE-AS1对HSF显著促进凋亡（P<0.05）,沉默lncRNA TRHDE-AS1对HSF显著抑制凋亡（P<0.05）。3.生物信息学分析显示lncRNA TRHDE-AS1包含一个结合miR-181a-5p的位点。双重荧光素酶报告实验结果显示lncRNA TRHDE-AS1可以与miR-181a-5p结合。qRT-PCR结果显示lncRNA TRHDE-AS1过表达时,miR-181a-5p表达受到抑制,lncRNA TRHDE-AS1敲低时,miR-181a-5p的表达上调。CCK-8法结果显示过表达miR-181a-5p逆转了lncRNA TRHDE-AS1抑制HSF增殖的作用（P<0.05）。流式细胞术结果显示过表达miR-181a-5p逆转了lncRNA TRHDE-AS1促进HSF凋亡的作用（P<0.05）。4.生物信息学预测显示PTEN 3’-UTR包含miR-181a-5p的结合位点。双荧光素酶报告基因结果显示PTEN是miR-181a-5p的靶基因之一。蛋白质印迹分结果显示,过表达miR-181a-5p降低PTEN的表达水平（P<0.05）,抑制miR-181a-5p表达增加PTEN的表达（P<0.05）。miR-181a-5p mimic可部分逆转lncRNA TRHDE-AS1过表达引起的PTEN表达增加。5.CCK-8分析显示,抑制PTEN可逆转lncRNA TRHDE-AS1过表达或miR-181a-5p敲低对细胞增殖的抑制作用。流式细胞术结果显示抑制PTEN可逆转lncRNA TRHDE-AS1过表达或miR-181a-5p敲低对HSF凋亡的促进作用（P<0.05）。结论1.在增生性瘢痕组织中,lncRNA TRHDE-AS1呈现低表达,而miR-181a-5p表达升高,且lncRNA TRHDE-AS1的水平与miR-181a-5p的水平呈负相关。2.LncRNA TRHDE-AS1通过miR-181a-5p/PTEN通路参与HS形成和发展。