【摘 要】
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目的:观察小陷胸汤对RAW264.7源泡沫细胞中ABCA1、ABCG1蛋白表达和胆固醇流出的影响,探讨小陷胸汤防治动脉粥样硬化的作用机理。方法:1.以不同浓度ox-LDL处理RAW264.7巨噬细胞以制备泡沫细胞模型,用油红0染色及实时荧光定量PCR技术鉴定筛选ox-LDL合适造模浓度。2.取RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞,铺板于96孔板中,以不同浓度的小陷胸汤孵育24 h,利用CCK-8试
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目的:观察小陷胸汤对RAW264.7源泡沫细胞中ABCA1、ABCG1蛋白表达和胆固醇流出的影响,探讨小陷胸汤防治动脉粥样硬化的作用机理。方法:1.以不同浓度ox-LDL处理RAW264.7巨噬细胞以制备泡沫细胞模型,用油红0染色及实时荧光定量PCR技术鉴定筛选ox-LDL合适造模浓度。2.取RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞,铺板于96孔板中,以不同浓度的小陷胸汤孵育24 h,利用CCK-8试剂盒检测细胞存活率,挑选小陷胸汤干预细胞的适宜浓度。3.在小陷胸汤高、中、低药物浓度下干预泡沫细胞24 h,油红0染色检测细胞脂质蓄积情况及细胞形态变化。4.用western blot技术测定各组中ABCA1、ABCG1蛋白的表达情况。5.使用NBD-胆固醇结合荧光酶标仪检测技术检测小陷胸汤对细胞内胆固醇流出的影响。结果:1.以25 μg/ml浓度的ox-LDL处理的细胞泡沫化形态典型、损伤适中,选为后续实验造模浓度。2.随着小陷胸汤浓度增加,细胞存活率呈下降趋势,选择合理浓度2.5 mg/ml、1.25 mg/ml、0.625 mg/ml作为后期实验高、中、低浓度。3.与模型组相比,高、中浓度组的小陷胸汤能够明显减轻细胞内的脂质蓄积。4.相较于模型组,高、中浓度组的小陷胸汤能够明显提高泡沫细胞中ABCA1、ABCG1蛋白的表达。5.小陷胸汤1.25 mg/ml浓度组能够明显促进细胞胆固醇外流。结论:小陷胸汤是通过上调RAW264.7源泡沫细胞内ABCA1和ABCG1蛋白的表达来实现减轻脂质蓄积、促进胆固醇流出的作用,发挥清化痰浊的功效,从而减缓AS的发生发展。
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