BMSCs对SD大鼠糖尿病溃疡创基成纤维细胞作用的研究

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目的:观察骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)在治疗SD大鼠糖尿病溃疡创面愈合中对成纤维细胞(fibroblast, Fb)生物学功能的作用和影响。通过检测BMSCs促进糖尿病溃疡创面愈合过程中Fb的形态、数量变化及增殖率,试图揭示BMSCs通过Fb途径促进糖尿病溃疡创面愈合的机制,为拓宽糖尿病溃疡创面的临床治疗手段提供实验室依据,丰富创面愈合理论。方法:提取同种异体SD大鼠BMSCs,传至第3、4代备用。将60只雄性SD大鼠随机分为3组,每组20只,空白对照组(A组)、糖尿病对照组(B组)、BMSCs治疗组(C组)。A组普通饲料喂养,B组、C组采用高脂高糖饮食+小剂量链脲佐菌素注射3天建立糖尿病大鼠模型。在SD大鼠背部制造2cm直径创面,3天后,制成溃疡模型,C组取含密度为1×109/L的BMSCs lml的DMEM/F12培养基悬浊液注射于创面下,A组、B组取不含BMSCs的lml DMEM/F12培养液注射于创面,分别于注射后即刻、3d、7d、14d、21d取创面组织制备切片,HE染色观察Fb生长情况,并提取组织中Fb,检测其增殖活力。结果:高糖高脂饮食+小剂量链脲佐菌素注射1周后测血糖A组大鼠血糖为3.91±0.44mmol/L,B组血糖为21.29±0.45mmol/L,C组血糖为21.46±0.51mmol/1,,B组、C组血糖明显高于A组(P<0.01);②BMSCs治疗后7天,计算创面愈合率,A组26.91±2.12%, B组7.55±2.11%,C组20.64±2.54%;③组织病理可见,与B组相比,C组创面组织中成纤维细胞数量明显增多,细胞核饱满,成纤维细胞增殖活力较强;④MTT实验证实,C组创面组织成纤维细胞增殖率较A组低,但高于B组。结论:在糖尿病溃疡创面愈合过程中,局部注射同种异体BMSCs可促进糖尿病溃疡创面局部Fb生长,从而促进创面愈合。
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