裸藻多糖的提取优化及其体外抗氧化活性研究

来源 :山西大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:demon3214
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裸藻多糖(paramylon)不仅在细胞干重中占有很大比例,而且是裸藻中最重要的储能物质。该多糖作为一种生物活性物质,近年来已逐渐成为研究的热点之一。裸藻多糖有多种活性,如抗病毒、降血糖、降脂、抗肿瘤及增强免疫等功能,在食品,医药,保健,化妆品,生物燃料,饲料等领域都得到了充分研究,已被列入新食品原料的行列。但是,目前还几乎没有专门对裸藻多糖的提取和体外抗氧化活性的测定进行研究的文章,为更好的利用裸藻多糖并为它在市场中的开发利用提供一定的理论依据,本文以绿色裸藻和纤细裸藻为实验材料,探究了纤细裸藻的生长周期;优化了碱提两种裸藻多糖的条件以及测定该多糖在体外抗氧化活性的强弱。具体结果如下:(1)将购买的纤细裸藻进行培养,待扩培至1 L时,开始对纤细裸藻的生物量进行测定,包括每天的藻密度、干重、吸光度和叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素、类胡萝卜素的浓度变化,通过记录这些数据,测定出纤细裸藻的生长周期为9 d。(2)将培养好的绿色裸藻和纤细裸藻离心冻干收获,进行多糖的提取。先以NaOH浓度、提取时间、提取温度对裸藻多糖(paramylon)得率的影响的单因素试验为基础,确定这三个因素的三个水平,再利用Design-Expert8.0.6.1软件进行响应面设计,进行Box-behnken中心组合试验来优化碱提裸藻多糖的提取工艺,确定出提取纤细裸藻多糖的最佳水平是:提取时间1.5 h、NaOH浓度0.7 mol/L、碱提温度为40℃,在此条件下,裸藻多糖的得率为20.57%;同时也确定出提取绿色裸藻多糖的最佳水平为:提取时间3 h、NaOH浓度0.6 mol/L、提取温度50℃,在此条件下多糖的实际得率为42.35%,较传统提取多糖方法分别提高了5.42%和16.22%。(3)测定提取出的裸藻多糖的体外抗氧化活性。采用铁氰化钾还原法、DPPH法和水杨酸显色法测定裸藻多糖总还原力的强弱和对DPPH自由基、羟自由基(·OH)的去除能力,同时将抗坏血酸设为阳性对照,结果显示,裸藻多糖清除DPPH自由基、·OH的半抑制质量浓度(IC50)分别为0.3 mg/mL、0.1 mg/mL,证实该多糖具有较好的体外抗氧化能力。综上,裸藻的生长周期较短,运用碱提法提取裸藻多糖确实比传统方法提高了多糖得率,而且提取出的多糖有较好的体外抗氧化活性,为裸藻多糖的实际应用提供了良好的理论基础。
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