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本文根据GenBank上发表的犬干扰素-γ(Interferon-γ，IFN-γ)和白细胞介素-2(Interteukin-2，IL-2)基因序列，设计了两对引物。采用RT-PCR技术以ConA刺激的犬脾淋巴细胞为材料，从总RNA中扩增出犬IFN-γ和IL-2基因。分离纯化扩增片段，克隆入pMD18-T载体，经酶切鉴定、PCR鉴定及DNA测序分析，表明扩增片段为犬IFN-γ和IL-2基因。测序结果显示克隆的IFN-γ基因全长426个核苷酸，编码141个氨基酸，与基因库中CaIFN-γ比较，核苷酸序列同源性为99.8％，推导的氨基酸序列同源性为99.3％；克隆的IL-2基因全长468个核苷酸，编码155个氨基酸，将该序列与基因库中D30710CaIL-2比较，核苷酸序列同源性为99.36％，推导的氨基酸序列同源性为98.7％。
应用DNA重组技术，将犬IFN-γ和IL-2基因分别插入到原核表达载体PJLA605中，构建原核表达质粒PJLA605-CaIFN-γ和PJLA605-CaIL-2，转化大肠杆菌DH5α，并通过改变诱导时机和诱导表达时间来优化表达条件。结果表明，工程菌PJLA605-CaIFN-γ和PJLA605-CaIL-2在30℃培养至对数生长后期(OD600为1.5)转温诱导4h，菌体湿重收得量分别达18.0g/L和17.8g/L，目标蛋白表达量分别占菌体总蛋白的27.4％和29.4％，这两种基因工程菌得到了理想表达。SDS-PAGE电泳显示，NaCl和TritonX-100可洗去部分杂蛋白，表达产物以包涵体形式存在。尿素溶解包涵体并通过Sephacry1 S-200分子筛初步纯化，包涵体的纯度均达到90％以上。复性后的IL-2蛋白用MTT法检测生物活性，结果显示稀释复性的IL-2蛋白淋巴细胞增殖系数可达2.01，表明此种蛋白具有IL-2的生物活性。