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硫代葡萄糖苷(Glucosinolates,简称硫苷)是一类葡萄糖衍生物的总称,是一类重要的亲水性次生代谢产物,广泛存在于15科植物中,其中最主要的是十字花科。烯丙基硫苷(Sinigrin)是硫苷的一种,是多种十字花科植物的风味成分,具有一定的药用价值。烯丙基硫苷的降解产物中烯丙基异硫氰酸酯具有抗癌抗肿瘤作用,并且还被广泛用于食品添加剂和食品抗菌剂。本研究在优化烯丙基硫苷的提取和HPLC检测条件的基础上,检测了20个油菜品种(品系)种子中烯丙基硫苷含量,筛选出了烯丙基硫苷含量较高的品种,建立了愈伤组织诱导和培养体系,研究了多种因素对愈伤组织硫苷含量的影响。本研究所得结论如下:1.通过提取条件的单因子试验,烯丙基硫苷的最佳提取条件为:提取剂:70%甲醇;提取温度:70℃;提取时间:30min;提取次数:3次;料液比:30:1。2.烯丙基硫苷HPLC分离检测的最佳条件为:流动相:甲醇:水(0.005mol/L KCl)=9∶91;流速:0.5ml/min;柱温:30℃;检测波长:230nm。3.油菜种子烯丙基硫苷含量检测结果表明:推广品种中陇油5号含量明显高于其他品种,其值高达19.38mg/g;11个杂交品系油菜种子中的烯丙基硫苷含量普遍高于推广品种。4.经筛选油菜愈伤组织诱导的最佳条件:黑暗条件;基本培养基MS;叶片:1.0mg/L2,4-D+ 2.0mg/L6-BA;茎段:0.2mg/L2,4-D +3.0mg/L 6-BA;根:0.2mg/L2,4-D+ 0.5mg/L6-BA;胚和胚乳:0.5 mg/L2,4-D +2.5 mg/L6-BA。5.油菜愈伤组织诱导的最佳部位为根和胚,其烯丙基硫苷含量也较高。6.油菜愈伤继代最佳培养基为:MS+3.0 mg/L6-BA+0.5 mg/L2,4-D。7.5种前体氨基酸添加对油菜愈伤组织的增殖无明显促进作用。缬氨酸添加浓度2mmol/L和4mmol/L对愈伤组织中烯丙基硫苷含量有明显促进作用;其他4种氨基酸对烯丙基硫苷含量没有促进作用。8.油菜愈伤增殖的最佳糖源为蔗糖,最佳添加浓度为30g/L。添加糖源均在10mg/L烯丙基硫苷含量最大,随着糖源添加浓度的增大其烯丙基硫苷含量下降。油菜愈伤组织无法利用乳糖进行增殖。9.愈伤组织增殖量第34天达到最大值,其烯丙基硫苷含量第6天达到最大值。就烯丙基硫苷总产量而言,第34-36天为愈伤的最佳收获期。