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本研究是以羊小肠粘膜提取肝素钠后的下脚料为原料,采用碱性蛋白酶进行酶解的试验,研究羊小肠粘膜最佳酶水解工艺条件。试验以酶添加量、酶解时间、酶解温度、pH值为酶解工艺的条件,以酸溶蛋白含量、水溶蛋白含量、总游离氨基酸含量、小肽含量、肽分子量分布为评价指标,通过L16(45)正交试验确定不同产物目标下最佳的酶解工艺条件,结果表明: 1、以酸溶蛋白和水溶蛋白含量为评价指标,确定碱性蛋白酶的最佳酶解条件:酶加量2.5%,酶解的时间4h,酶解的温度60℃,酶解的pH值10。 2、以总游离氨基酸含量为评价指标,确定碱性蛋白酶的最佳酶解条件:酶加量2.5%,酶解的时间6h,酶解的温度50℃,酶解的pH值10。 3、以小肽含量为评价指标,确定碱性蛋白酶的最佳酶解条件:酶加量3%,酶解的时间7h,酶解的温度60℃,酶解的pH值10。 4、以小于1000Da的肽分子量分布为评价指标,确定碱性蛋白酶的最佳酶解条件:酶加量3%,酶解的时间7h,酶解的温度60℃,酶解的pH值6。 5以小于2000Da的肽分子量分布为评价指标,确定碱性蛋白酶的最佳酶解条件:酶加量3%,酶解的时间7h,酶解的温度60℃,酶解的pH值10。 综上所述,在本试验条件下,以碱性蛋白酶为水解酶,以不同产物(酸溶蛋白含量、水溶蛋白含量、游离氨基酸总量、分子量小于1000Da小肽、分子量小于2000Da的小肽)作为评价指标,可以分别得到对应的酶解工艺条件。