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第一部分MDR1、MRP1、LRP基因在T24/ADM细胞中的表达及其作用机理的研究目的：检测MDR-1、MRP、LRP基因在T24/ADM细胞中的表达,并初步探讨其作用机理。方法：通过ADM浓度梯度递增诱导法建立T24/ADM多药耐药细胞系,以亲本T24细胞作为对照组,MTT法检测多药耐药T24/ADM细胞对药物的敏感性,共聚焦显微镜观察细胞内阿霉素(Adriamycin, ADM)分布及P-gp阻滞剂维拉帕米(verapamil, Ver)对其的影响。RT-PCR检测多药耐药基因(Multidrug resistance gene, MDR-1)肺耐药相关蛋白(Lung Resistance-related Protein, LRP)基因及多药耐药相关蛋白(multidrug resistance protein, MRP1)基因的mRNA表达水平.结果：T24/ADM细胞对ADM耐药性增高,耐药指数为4.86。T24/ADM细胞细胞质及细胞核平均ADM荧光强度分别为504.380±79.5、166.304±18.6,明显低于T24细胞(715.058、226.807), p<0.05。Ver干预后,T24/ADM细胞质内平均ADM荧光强度为624.097±60.5,较非Ver干预组T24/ADM细胞(504.3802±79.5)明显升高,p<0.05。RT-PCR检测T24/ADM细胞内MDR-1及MRP1基因mRNA相对表达量分别为0.382±0.075和1.053±0.081,较其亲本T24细胞明显升高,p<0.05。LRP基因在T24及T24/ADM细胞中相对表达量分别为0.792±0.068和0.823±0.052,二者无明显差异,p>0.05。结论：①MDR-1基因过度表达降低细胞质内药物浓度而使细胞耐药,是T24/ADM多药耐药的分子基础。②MRP1基因在ADM诱导T24细胞产生耐药性过程中表达明显升高,但其作用机理尚不明确,有待进一步研究。③LRP基因在T24细胞及T24/ADM细胞中均有表达,两者无明显差异,不能作为T24/ADM细胞产生多药耐药性的分子指标。第二部分MRP1、MRP、LRP基因在裸鼠T24/ADM原位膀胱癌中的表达及意义目的：检测P-gp、MRP、LRP基因在裸鼠T24/ADM原位膀胱癌组织中的表达,并探讨其表达意义方法：通过膀胱内细胞移植法建立裸鼠T24/ADM原位膀胱癌模型及裸鼠T24原位膀胱癌模型,分别取两组膀胱癌组织,RT-PCR法检测MDR-1, MRP1基因及LRP基因的mRNA相对表达水平,胰酶消化法将肿瘤组织制成单细胞悬液,MTT法检测其对药物的敏感性,共聚焦显微镜观察其细胞质及细胞核内ADM浓度变化。结果：T24/ADM原位膀胱癌内MDR-1及MRP1基因的mRNA相对表达水平分别为0.406±0.084和0.725±0.051,明显高于T24原位膀胱癌,p>0.05; T24/ADM原位膀胱癌内LRP基因相对表达量(0.813±0.065),分别与T24原位膀胱癌(0.725±0.051)相比无明显差异，p>0.05。MTT法检测结果T24/ADM组肿瘤组织细胞对ADM的耐药性明显升高,耐药指数为3.30。T24/ADM原位癌组细胞质及细胞核内平均ADM荧光强度(503.185±44.6,185.426±19.0),明显低于T24原位癌组(725.530±49.1,218.589±24.3),p<0.05。结论：①1.MDR-1基因在裸鼠T24/ADM原位膀胱癌过渡表达,是该动物模型肿瘤组织多药耐药的分子基础。②MRP1基因在裸鼠T24/ADM原位膀胱癌仍过渡表达。③3.LRP基因在裸鼠T24/ADM原位膀胱癌及裸鼠T24原位膀胱癌中表达无明显差异,不能作为该动物模型肿瘤组织多药耐药的分子指标。