传统的细胞收获法是采用胰蛋白酶消化,然而胰蛋白酶的消化不可避免地降解细胞膜蛋白和沉积的细胞外基质(ECM),导致细胞活力降低甚至某些功能的丧失,影响治疗级细胞产品的质量。聚(N-异丙基丙烯酰胺)(PNIPAM)是一种可用于细胞培养与温控脱附的温敏性智能材料,然而,PNIPAM温敏性材料存在细胞脱附速率慢且细胞成片脱落的问题,影响其在细胞培养中应用。为此,本文通过不同基材的微球,制备了接枝PNIPAM温敏性微球,并通过控制温度实现了细胞在微球上的贴附、扩增和分散脱附。本文首先以Cytodex 3和SiO2微球为基材,分别采用“Grafting to”法和“Grafting from”法成功制备了 PNIPAM-Cytodex 3微球和PNIPAM-SiO2微球,并以Hela细胞为对象,考察了该微球对细胞贴附、生长以及脱附的影响,结果发现,这两种微球均在一定程度上可支持Hela细胞的贴附与生长,但都未能实现细胞的温控脱附。其次,以聚苯乙烯微球为基材,通过“Grafting from”法制备了不同PNIPAM接枝量的聚苯乙烯微球。利用Hela细胞评估不同PNIPAM接枝量的聚苯乙烯微球对细胞贴附、生长和脱附的影响,发现在聚苯乙烯微球上接枝PNIPAM可以促进Hela细胞的贴附和扩增;PNIPAM接枝量为67.45μg/cm2和154.16μg/cm2的聚苯乙烯微球可以实现细胞的温控脱附,并且细胞的温敏脱附速率会随聚苯乙烯微球上PNIPAM接枝量的增大而增大。采用CCK-8法考察了温敏脱附过程对细胞再增殖能力的影响,发现从微球上温敏脱附的细胞具有良好的再增殖能力。最后,进一步将筛选出的温敏性聚苯乙烯微球用于间充质干细胞(MSCs)的体外培养,根据MSCs细胞的贴附、扩增、脱附以及收获的MSCs细胞的再增殖能力和分化能力等指标,评价所制备微球在MSCs细胞培养中的应用,发现温敏性聚苯乙烯微球微球可以支持细胞的贴附,促进细胞的扩增,实现细胞的温控脱附,并且温敏脱附的MSCs细胞具有良好的再增殖和分化能力。