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研究背景Tribbles (TRIBs)是最近几年新发现的一个假性蛋白激酶家族,在癌症和糖尿病发生发展过程中对细胞信号传导通路和生化过程起着重要的调控作用。TRIB1可通过丝裂原活化的蛋白激酶(mitrogen-acitivated protein kinase, MAPK)途径调控血管平滑肌细胞的增殖和趋化作用,此外TRIB1在动脉粥样硬化患者中表达水平较一般人群增高。研究发现TRIB1基因多态性与甘油三酯水平关系密切,与冠状动脉疾病发生危险性升高有关。但TRIB1作用的确切机制尚不十分清楚。研究目的本研究旨在探讨中国北方地区汉族人TRIB1基因rs17321515,rs2235108,rs2235110三个多态性位点的基因型和等位基因频率分布特点,对血糖、血脂水平的影响,及其与2型糖尿病、冠心病和2型糖尿病合并冠心病的关系,为动脉粥样硬化性心血管病的防治提供科学依据。对象和方法研究对象均为我国北方地区汉族人群,包括148例对照组、98例2型糖尿病组(DM组)、88例冠心病组(CHD组)和76例2型糖尿病合并冠心病组(DM+CHD组)。采用改良碘化钠(sodium iodide, NaI)法提取基因组DNA,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism, PCR-RFLP)技术分析TRIB1基因多态性。血清总胆固醇(total Cholesterol, TC)、三酰甘油(triglyceride, TG)采用酶法测定；高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterol, HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(1owdensity lipoprotein cholesterol, LDL-C)采用直接匀相法测定；血糖(glucose, Glu)采用葡萄糖氧化酶法测定；糖化血红蛋白(hemoglobin A1c, HbA1c)采用高效液相层析法测定。应用Excel2007和SPSS13.0软件进行数据处理和统计学分析。结果1.DM组、CHD组和DM+CHD组的体重指数(body mass index,BMI)、HbA1c、Glu、TG平均水平明显高于对照组,HDL-C平均水平明显低于对照组。2.我国北方地区汉族人TRIB1基因rs17321515多态性AA、AG、GG基因型频率分别为15.1%、50.0%。34.9%,A、G等位基因频率分别为40.1%、59.9%,与欧洲人、日本人、非裔美洲人和撒哈拉以南非洲人比较接近,不同国家地区不同种族人群间TRIB1基因rs17321515多态性分布无统计学差异。3.我国北方地区汉族人TRIB1基因rs2235108多态性CC、CT、TT基因型频率分别为83.4%、15.9%、0.7%,C、T等位基因频率分别为91.3%、8.7%；rs2235110多态性AA、AG、GG基因型频率分别为33.4%、51.2%、15.4%,A、G等位基因频率分别为59.0%、41.0%,与其他不同国家地区不同种族人群分布有显著差异。4.TRIB1基因rs17321515多态性携带G等位基因(AG+GG基因型)可能是DM+CHD患者TG水平异常的一个危险因素。TRIB1基因rs17321515多态性与TC、LDL-C、HDL-C水平无明显相关。5.在一般人群中,TRIB1基因rs2235108多态性与HbA1c和Glu水平高低无显著关联,携带T等位基因(CT+TT基因型)可能与冠心病患者TG水平升高有关。6.TRIB1基因rs2235110多态性G等位基因可能与2型糖尿病患者HbA1c水平升高、2型糖尿病合并冠心病和一般人群中HDL-C水平降低相关。7.各组间TRIB1基因rs17321515和rs2235110多态性基因型和等位基因分布均无显著差异。TRIB1基因rs2235108多态性分布在2型糖尿病合并冠心病患者中可能存在性别差异。8.TRIB1基因rs17321515,rs2235108,rs2235110多态性不是2型糖尿病、冠心病和2型糖尿病合并冠心病发病的独立危险因素。结论本研究建立了碘化钠(NaI)法快速提取基因组DNA, PCR-RFLP法分析TRIB1基因多态性的方法。该方法简便快捷,易于操作,适合大规模流行病学调查和临床实验室采用。对照组、2型糖尿病组、冠心病组和2型糖尿病合并冠心病组之间TRIB1基因rs17321515和rs2235110多态性基因型和等位基因分布频率无显著差异。DM+CHD组中不同性别间rs2235108 SNP基因型和等位基因分布频率差异有统计学意义。TRIB1基因rs17321515多态性携带G等位基因(AG+GG基因型)可能与2型糖尿病合并冠心病患者TG水平异常有关。TRIB1基因rs2235108多态性T等位基因与冠心病患者TG升高有关。TRIB1基因rs2235110多态性G等位基因与2型糖尿病患者HbAlc水平升高、2型糖尿病合并冠心病和一般人群中HDL-C水平降低相关。TRIB1基因rsl7321515、rs2235108、rs2235110多态性不是中国北方汉族人2型糖尿病、冠心病、2型糖尿病合并冠心病发病的独立危险因素。