本研究以传统复方吴茱萸汤为研究对象,对其化学物质基础、质量控制方法、相关成分药代动力学和对偏头痛大鼠的代谢组学进行了研究,为该复方的现代临床应用和开发提供依据。研究内容如下：吴茱萸汤的化学物质基础。将传统的液液萃取样品处理方法与现代高效液相-串联质谱联用技术(HPLC-MS/MS)相结合,对吴茱萸汤的氯仿萃取部位和正丁醇萃取部位分别进行了分离分析,发现44个色谱峰,并对各色谱峰的药材来源进行归属。根据各个色谱峰一级质谱信息和二级质谱信息共鉴定出18个成分,分别为吴茱萸中的去氢吴茱萸碱、N13-甲基-2-甲氧基-吴茱萸次碱、吴茱萸宁碱、12α-羟基柠檬苦素、吴茱萸内酯、吴茱萸内酯醇、吴茱萸酰胺、吴茱萸苦素乙酸酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱和绿原酸；生姜中的6-姜酚；人参中的人参皂苷Rg1,Re, Rf, Rbl,Rd,Ro。本研究还通过对比吴茱萸汤体外样品(氯仿萃取部位)、空白血浆样品和给药后血浆样品的色谱图,分析各色谱峰的一级质谱和二级质谱数据,发现大鼠口服吴茱萸汤后的5个入血成分,鉴定出其中4个,分别为去氢吴茱萸碱、N13-甲基-2-甲氧基-吴茱萸次碱、吴茱萸宁碱和吴茱萸内酯,初步确定吴茱萸汤体内作用物质基础。吴茱萸汤的质量控制。建立了同时测定吴茱萸中绿原酸、去氢吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法,采用Apollo C18色谱柱,流动相为乙腈-0.02%磷酸水梯度洗脱,在225 nm和345 nm处双波长检测,5个待测成分在考察范围内线性关系良好(n=6,r>0.9995),回收率在99.3%～100.4%之间,RSD均小于2.1%。采用本方法,测定了13批不同来源吴茱萸中5种成分的含量,同时对吴茱萸经不同方法炮制后5种成分的变化进行了测定,结果表明不同来源吴茱萸中5种成分的含量差别较大,经不同方法炮制后5种成分的含量均发生了变化。建立了同时测定吴茱萸汤中绿原酸、去氢吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸碱、吴茱萸次碱和6-姜酚的RP-HPLC方法,测定了3批吴茱萸汤样品中6种成分的含量,同时对复方中4味药材(吴茱萸、生姜、人参和大枣)不同配伍时6种待测组分的提取量进行了考察。结果表明在吴茱萸汤中柠檬苦素类化合物吴茱萸内酯的含量最高,约为0.48%,其次为生物碱类成分,去氢吴茱萸碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的总含量为0.43%,绿原酸和6-姜酚的含量分别为0.11%和0.10%。实验所建立的方法简单、准确,可为吴茱萸和吴茱萸汤的质量控制提供方法。吴茱萸汤中相关成分的大鼠血浆药动学。首次建立了同时测定大鼠血浆中去氢吴茱萸碱和吴茱萸内酯浓度的高效液相-质谱联用(HPLC-MS)方法。以多潘立酮为内标,血浆经乙酸乙酯萃取后取上清液,吹干,流动相复溶后进样分析。去氢吴茱萸碱和吴茱萸内酯分别在1.0～500 ng/ml和2.0～1000 ng/ml范围内线性关系良好,定量下限分别为1.0和2.0ng/ml,待测物和内标的提取回收率均大于70.76%,方法的专属性、基质效应、精密度、准确度和稳定性均符合生物样品分析要求。采用所建立的方法测定了大鼠灌胃给予去氢吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸水煎液和吴茱萸汤后去氢吴茱萸碱和吴茱萸内酯的血浆浓度,考察了给药后去氢吴茱萸碱和吴茱萸内酯在大鼠体内的药动学行为。大鼠灌胃给予去氢吴茱萸碱、吴茱萸水煎液和吴茱萸汤后,去氢吴茱萸碱的达峰浓度Cmax分别为122.5±78.6,53.36±7.67,36.79±9.11 ng/ml,曲线下面积AUC0-∞分别为798.2±354.4,677.1±297.0,149.2±42.9 ng×h/ml,半衰期T1/2分别为4.4±1.4,10.1±2.9,3.8±1.3 h；大鼠灌胃给予吴茱萸内酯、吴茱萸水煎液和吴茱萸汤后,吴茱萸内酯的达峰浓度Cmax分别为67.78±46.25,695.6±265.8,765.9±256.1 ng/ml,曲线下面积AUC0-∞分别为205.9±56.2,3992±1444,1691±400 ng×h/ml,半衰期T1/2分别为4.9±1.9,5.5±2.8,3.9±2.4 h。结果表明：大鼠口服去氢吴茱萸碱、吴茱萸内酯、吴茱萸水煎液或吴茱萸汤后,去氢吴茱萸碱或吴茱萸内酯在大鼠体内的药动学行为具有显著性差异。吴茱萸汤对偏头痛模型大鼠干预作用的代谢组学。应用皮下注射硝酸甘油法制备偏头痛大鼠模型,并对造模后大鼠的挠头次数进行统计,确定造模成功。建立代谢组学研究的UPLC-MS方法,采用ACQUITY UPLC TM BEH C18色谱柱,乙腈-0.1%甲酸水梯度洗脱,ESI正离子扫描,扫描范围m/z 150～900。应用建立的UPLC-MS方法对空白组、模型组、吴茱萸汤给药组和氟桂利嗪给药组大鼠的血浆和尿液进行分析,将得到原始图谱数据经Masslynx软件处理,进行主成分分析(PCA),散点分布图(Score plot)表明造模后大鼠的血浆和尿液的代谢物组与空白组偏离,得到很好的区分,而吴茱萸汤给药组和氟桂利嗪给药组大鼠的血浆和尿液的代谢物组均有向空白组方向回调趋势,表明吴茱萸汤具有预防大鼠偏头痛的作用。根据负载图(Loading plot)筛选出血浆中的5个生物标记物,分别为溶血磷脂胆碱16：0、溶血磷脂胆碱18：0、溶血磷脂胆碱18：2、溶血磷脂胆碱20：4和胆酸,尿液中5个生物标记物,分别为黄尿酸、犬尿酸、马尿酸、苯乙酰甘氨酸和十六-二氢鞘氨醇,并对溶血磷脂胆碱、胆酸、黄尿酸和犬尿酸与偏头痛发生的机制进行阐释,说明其与偏头痛发生的关系。