氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫发育、工蜂生存能力及肠道菌群的影响

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:asdfghjka
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本研究旨在研究3个低浓度氟胺氰菊酯对西方蜜蜂幼虫发育、工蜂生存能力及肠道微生物群落结构的影响,为蜜蜂的健康养殖提供理论参考。实验通过饲喂法,从2日龄幼虫起每天用微量进样器分别给小幼虫饲喂2μL含有氟胺氰菊酯0.5、5和50mg/kg的糖水,用含丙酮体积0.025%的糖水作对照组,并进行标记,直到幼虫封盖。测定各组幼虫封盖率、6日龄幼虫解毒酶活力及其总蛋白,观察氟胺氰菊酯对幼虫发育的影响;待实验组工蜂羽化出房后,按原来分组及饲喂含有不同浓度氟胺氰菊酯的糖水,饲喂7天后,采集7日龄工蜂肠道微生物进行宏基因组测序,同时利用蜜蜂无限射频技术(Radio frequency identification,RFID)监测各组工蜂自然出巢归巢和定距离放飞归巢能力,分析氟胺氰菊酯对工蜂归巢能力和肠道菌落的影响;另外,通过荧光定量PCR分析氟胺氰菊酯对工蜂不同日龄段(1日龄,7日龄,20日龄)头部免疫、解毒及学习记忆相关基因表达的影响。幼虫发育测试结果显示,当食物中氟胺氰菊酯达到50mg/kg,会降低幼虫的封盖率,但四个实验组之间刚封盖幼虫体重差异不显著;当食物中氟胺氰菊酯达到50mg/kg时,会提高幼虫细胞色素P450酶活力,但氟胺氰菊酯处理对谷胱甘肽-S-转移酶GST及羧酸酯酶CarE没有影响;随着氟胺氰菊酯浓度的增加,幼虫超氧化物歧化酶SOD活性逐渐增强,四个实验组之间存在显著差异,但幼虫总蛋白浓度呈现下降的趋势,50mg/kg组及0.5mg/kg组总蛋白浓度显著低于对照组;羽化质量检测发现,四个实验组工蜂羽化率及初生重差异不显著。RFID动态监测结果表明,药物处理组对工蜂的首次出巢率,平均寿命及生存能力没有显著影响,但50mg/kg组会显著影响工蜂的平均出巢采集次数,且在2000m处进行放飞发现,50mg/kg组会显著影响工蜂的归巢率及归巢时间。荧光定量PCR结果显示,食物中含氟胺氰菊酯会影响工蜂免疫、解毒及学习记忆相关基因的表达。当食物中胺氰菊酯达到5mg/kg时会抑制7日龄及20日龄工蜂头部学习记忆相关记忆Nmdar1、Nmdar2及PKA基因的表达,当食物中氟胺氰菊酯达到50mg/kg时会诱导免疫基因Hymenoptaecin基因和解毒基因CYP450基因长时间的高表达。通过宏基因组测序发现:食物中含较低剂量氟胺氰菊酯容易引起变形菌门的滋生,而食物中含较高剂量氟胺氰菊酯容易引起子囊菌门滋生。从物种聚类进一步看出,50mg/kg组单聚为一支,和其他三个组区分开来。物种基因注释可知,高剂量50mg/kg组Snodgrassella alv等蜜蜂核心菌种相对于对照组及两个低剂量组显著减少,而高剂量组Zygosaccharomyces rouxii菌相对于对照组及两个低剂量显著增多。
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